摘要
二斑叶螨（Tetranychus urticae Koch）属于蜱螨亚纲叶螨科叶螨属，是一种世界性害螨。目前，化学防治仍然是二斑叶螨综合防治中最主要的措施。由于不科学、不合理的用药方式，二斑叶螨已经对多种杀虫剂产生不同程度抗性。近年来，许多研究证实共生菌可以通过直接或间接的方式影响宿主抗药性。内共生菌Wolbachia是二斑叶螨体内的优势细菌，其对叶螨抗药性是否产生影响尚不清楚。探究二斑叶螨体内Wolbachia对宿主抗药性的影响，有利于进一步了解叶螨抗药性的机理，对防治二斑叶螨具有重要意义。主要研究结果如下： 1.感染和未感染Wolbachia二斑叶螨对不同杀螨剂抗性的分析 使用浸叶法比较感染和未感染Wolbachia的二斑叶螨在阿维菌素、哒螨灵、丁氟螨酯处理后的存活率。统计结果发现，感染Wolbachia的二斑叶螨在同种杀螨剂处理下的LC50均高于未感染的种群，表明感染Wolbachia的二斑叶螨对杀螨剂表现出更高水平的抗性。 2.Wolbachia提高二斑叶螨抗药性原因分析 通过对已知叶螨抗性相关的靶标位点基因测序，发现两个种群的关键抗药基因位点基因型一致，排除叶螨抗性差异是由靶点突变引起。使用转录组测序比较感染和未感染Wolbachia的二斑叶螨基因表达水平，发现在Wolbachia影响下大量解毒酶相关基因表达上调，推测两个种群产生抗性差异的原因是解毒酶基因的差异表达。进一步比较两个种群解毒酶活性，结果表明P450s、GSTs、CCEs三种解毒酶活性在未使用农药处理时两者间没有显著差异，但使用农药处理后，感染Wolbachia二斑叶螨的P450s和GSTs活性显著高于未感染的二斑叶螨。选取受Wolbachia诱导上调表达的二斑叶螨解毒酶基因tetur01g02510（TuGSTd05）和tetur03g04990（CYP392D2）进行RNA干扰。结果证明这两种解毒酶参与二斑叶螨对杀螨剂的抗性作用。通过测试在不同浓度阿维菌素处理后叶螨体内Wolbachia 密度变化，发现 Wolbachia 密度在50 ppm浓度阿维菌素处理后的48 h内有明显上升，说明杀螨剂处理会引起宿主体内共生菌发生变化。 综上所述，Wolbachia可以通过调控宿主解毒酶基因表达提高二斑叶螨抗药性，研究结果有助于我们进一步探究共生菌介导宿主抗药性的机理。
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