摘要
随着我国水产养殖产业不断增长，病害日益成为产业健康可持续发展的重要限制因素。病害发生引起的大量死亡以及防控中化学和抗生素类药物使用所引起的病原菌耐药性、药物残留等问题引起社会广泛关注。研发水产养殖病害防治中新型替抗药物存在迫切技术需求。丹皮酚（Paeonol）是一种药理活性广泛、高效、低毒的中草药单体，但在水产动物中所起作用及机理鲜有报道。 本文以丹皮酚为研究对象，首先分析了丹皮酚对淡水养殖中常见细菌性出血病的病原菌株嗜水气单胞菌（Aeromonas hydrophila）的最低抑菌浓度（MIC）、生长曲线以及运动能力、脂肪酶活性、蛋白酶活性和溶血活性等毒力相关因子的影响；其次，通过构建异育银鲫（Carassius auratus gibelio）的嗜水气单胞菌感染模型，评估丹皮酚对异育银鲫存活率、组织学、血液生化、肝脏酶活性、炎症基因表达量的影响。最后，采用脂多糖（Lipopolysaccharide, LPS）诱导异育银鲫肝脏氧化应激和炎症反应，揭示丹皮酚对鱼体炎症调控的作用机制。主要研究结果如下： 体外试验表明，丹皮酚对嗜水气单胞菌 MIC 为 1024 μg/mL；丹皮酚浓度小于64 μg/mL时，对嗜水气单胞菌的生长影响不显著；丹皮酚浓度大于 128 μg/mL时，嗜水气单胞菌生长受到明显抑制。丹皮酚浓度为 4-32 μg/mL 时，对嗜水气单胞菌运动能力、脂肪酶活性、蛋白酶活性无明显影响（P＞0.05），但能显著降低溶血活性（P＜0.05）。 嗜水气单胞菌攻毒试验显示，丹皮酚能够提高异育银鲫感染后的存活率；血液生化指标中，治疗组鱼在 6 h 时的血液 LDL 含量显著下降（P＜0.05）；肝脏酶活性指标中，治疗组的 CAT、T-AOC、GSH-Px 活性在 6 h 显著高于感染组，MDA水平、MPO 活性显著低于感染组（P＜0.05）；炎症相关基因 MyD88、TLR-5 mRNA表达量显著降低，TLR-3 mRNA在 72 h 表达量显著上升（P＜0.05）；治疗组肝脏、脾脏、肾脏组织损伤明显改善。 腹腔注射 LPS（20 mg/kg）后，鱼体 ALT、AST、DAO、ALP 活性和 GLU水平明显增加（P＜0.05）。LPS攻毒组MPO活性和MDA含量显著上升，而CAT和 GSH-Px 活性均显著下降（ P＜0.05 ），丹皮酚治疗后明显减轻了上述变化（P＜0.05）。丹皮酚显著下调了LPS介导的TLR4、TIRAP、MyD88、TNF-α、IL-1β和 IL-8 mRNA过度表达（P＜0.05）。此外，组织病理学结果表明，丹皮酚改善了LPS诱导的鱼体肝脏组织病变。
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