摘要
背景: 结直肠癌(Colorectal cancer，CRC)是最常见的癌症之一，是全球主要的健康负担，目前CRC在全球发病率排名第三，死亡率排名第二。结直肠癌的发病率在每个国家都不一样，在中国估计每年发生超过37.6万例新病例和19.1万例死亡。近几十年来，由于结肠镜检查筛查的增加，65岁以上成年人的CRC发病率和死亡率稳步下降，而50岁以下的成年人中CRC发病率则呈上升趋势，故迫切需要早期发现和预防CRC的新策略。与许多疾病一样，CRC的病因非常复杂，涉及遗传和环境因素，环境因素如不良饮食习惯、吸烟、体重增加和肥胖、糖尿病和大量饮酒，是导致散发性结直肠癌的主要因素。与CRC发病关系密切的量化指标明确对于健康人中的CRC发生风险评估、预防措施实施均有重要意义。 黏结蛋白聚糖2（Syndecan-2，SDC2）是一种细胞表面硫酸肝素蛋白聚糖，其功能是作为细胞外基质成分的受体而报道。SDC2可抑制细胞增殖、血管生成、肿瘤生长和转移，启动子甲基化可抑制组织因子途径抑制物2（tissue factor pathway inhibitor2 ， TFPI2 ）的表达，可能通过调控肿瘤细胞的代谢程序参与CRC的发生。生物信息学分析结果表明，SDC2启动子甲基化水平与CRC高度相关。较多研究证实，SDC2的大部分CpG岛(CpG island)位点在CRC组织中高甲基化，甲基化的SDC2在CRC和腺瘤（Adenoma，Ade）粪便样本中具有较高的阳性检出率。鉴于既往研究成果，不少学者提示粪便SDC2甲基化水平检测可能在CRC的辅助诊断、预后评估等方面均有潜在作用。 目的: 探讨CRC与非CRC人群的各个资料及数据值差异，分析CRC发生的可能危险因素用于后续高危人群界定、筛查项目开展等。明确CRC 患者粪便SDC2基因甲基化水平及阳性率变化情况，分析该变化对CRC辅助诊断、术后复发预测及对无病生存期的影响，为后续CRC的诊断寻找更多简便可靠的指标，为患者根治术后复发风险评估、保守治疗方案制定等提供指导，最终服务于CRC的早期筛查、优化治疗、治疗结局优化等。 方法: 选取2020年9月-2022年12月在本院消化内科、胃肠外科住院且完成纤维结直肠镜检查的患者389例作为研究对象，根据结肠镜检查、病理检查结果，将所有入组患者分为CRC组（n=76）、腺瘤组（n=89，包括进展性腺瘤、非进展性腺瘤）、非腺瘤性息肉组（n=154）、正常对照组（n=70）。对比上述各组研究对象的基础资料及血液检测指标，采用单因素、多因素logistics回归模型分析CRC发生的危险因素。收集各组研究对象的粪便标本、提取其中DNA并采用实时定量甲基化特异性PCR（quantitative methylation-specific PCR，qMSP）测定粪便标本中的 SDC2 基因甲基化情况，采用受试者工作特征（ Receiver operating characteristic，ROC）曲线分析粪便SDC2基因甲基化水平对CRC的辅助诊断价值。CRC患者均接受根治性手术，术后进行长期随访并记录复发组（n=28）、未复发组（n=48），对比其术前粪便组织中SDC2基因甲基化水平及阳性率差异，分析粪便SDC2基因甲基化对CRC患者术后复发的预测价值，以及CRC患者粪便SDC2基因甲基化情况与无病生存期（Disease-free survival， DFS）的关系。 结果:CRC组、腺瘤组、非腺瘤性息肉组、正常对照组的性别、体质指数、吸烟史、高血压、糖尿病、高脂血症及炎症指标CRP、IL-6阳性情况等资料的分布差异无统计学意义（P＞0.05）。CRC组、腺瘤组、非腺瘤性息肉组、正常对照组的年龄、大便情况、消化道肿瘤家族史、HP感染情况及血清CEA、CA199水平的差异有统计学意义（P＜0.05）。单因素分析发现，年龄＞60周岁、大便异常、消化道肿瘤家族史、Hp感染、CEA阳性、CA199阳性可能是CRC发生的危险因素（P＜0.05）。多因素Logistics回归模型分析发现，大便异常、合并消化道肿瘤家族史、合并Hp感染是CRC发生的独立危险因素（P＜0.05）。CEA阳性、CA199阳性在诱导CRC发生中的关系尚不显著（P＞0.05）。CRC组的粪便SDC2基因甲基化Ct值分别低于腺瘤组、非腺瘤性息肉组、正常对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）。CRC组患者的粪便SDC2基因甲基化阳性率分别高于腺瘤组、非腺瘤性息肉组、正常对照组，差异均有统计学意义（P＜0.05）。ROC曲线显示，粪便SDC2基因甲基化Ct值辅助诊断CRC的最佳截断值为37.39，AUC为0.866[95%CI 0.799~0.934]，对应的灵敏度、特异度分别为73.58%、75.00%。复发组患者的SDC2基因甲基化水平低于未复发组患者， SDC2 基因甲基化阳性率高于未复发组患者，差异均有统计学意义（ P＜0.05）。ROC曲线显示，粪便SDC2基因甲基化水平预测CRC患者术后复发的最佳截断值为33.50，AUC为0.842[95%CI 0.763~0.922]，对应的灵敏度、特异度分别为76.74%、69.05%。CRC患者中，粪便SDC2基因甲基化阳性者的复发率高于阴性者，无复发生存期短于阴性者，差异有统计学意义（ P＜0.05 ）。Kaplan-Meier生存曲线显示，CRC患者中粪便SDC2基因甲基化阴性患者的无复发生存情况优于阳性者（P＜0.05）。 结论:CRC是一个多因素综合影响而产生的恶性肿瘤性疾病，本文明确了其发生受大便异常、合并消化道肿瘤家族史、合并Hp感染等影响，而炎症指标、肿瘤标志物水平改变对于CRC的促发作用在本文中尚不明确。粪便SDC2基因甲基化阳性率在CRC患者中大幅升高，阳性者的CRC患病风险较高，可能成为CRC筛查的重要指标之一。同时粪便SDC2基因甲基化阳性情况检测也有助于CRC根治术后复发风险的评估，阳性者术后无病生存期较短、是预后不良的重要标志之一。积极预防易导致CRC发生的相关因素并做好早期干预工作，对高危人群同时检测粪便SDC2基因甲基化情况，可能在提高CRC早期检出率、优化治疗结局方面有一定助益。
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