摘要
目的： 肺癌是导致全球癌症相关死亡的主要原因之一,非小细胞肺癌(NSCLC)是其中最主要的类型,约占肺癌患者总数的85%,主要包括肺腺癌(LUAD)和肺鳞癌(LUSC)两种类型.尽管在手术、化疗、免疫治疗和靶向治疗等方面有了一定进展,但晚期 LUAD 患者的预后仍然不理想.因此,识别预测 LUAD 治疗反应的潜在生物标志物具有重要的临床意义.Anillin(ANLN)是一种肌动蛋白结合蛋白,已被证实是细胞分裂的关键因素之一,它是一种多域蛋白,可与多种蛋白相互作用. 通过生物信息学探索ANLN在LUAD中是否具有预后价值,建立预后模型,并进行富集分析、肿瘤微环境、免疫治疗反应、药物敏感性分析和体细胞突变等分析,揭示ANLN在LUAD发展中的机制. 通过免疫组织化学(IHC)染色验证 ANLN 表达在 LUAD 中是否具有临床应用价值.验证内容包括ANLN的表达是否与LUAD患者的TNM分期、浸润范围、Ki67表达、性别和年龄相关. 方法： 生物信息学分析:从癌症基因组图谱数据库(TCGA)1.0 版本下载LUAD转录组表达数据及相应的临床信息.分析ANLN在LUAD中的差异表达.根据ANLN表达量的中位数将LUAD患者分组,分析组间的预后情况,并绘制ROC曲线评估预测预后的特异性和敏感性.绘制箱线图,展示ANLN表达与LUAD患者临床信息的相关性.构建列线图用于预测 LUAD 患者的预后,并绘制校准曲线评价其准确性.使用单因素和多因素COX回归分析评估ANLN是否为LUAD的独立预后因素.通过基因相关性分析,挖掘出与 ANLN 相关性最强的基因.进行富集分析、免疫浸润分析、免疫检查点分析、药物敏感性分析和体细胞突变等分析探讨ANLN在LUAD中发展中的机制. IHC染色:随机选取江门市中心医院胸外科2020年至2023年的90 例 LUAD 患者肿瘤组织切片和配对的 90 例癌旁组织切片,通过IHC染色将LUAD患者分为ANLN阳性、阴性表达组,使用SPSS29.0软件进行统计学分析,验证ANLN表达在LUAD中的临床应用价值.90例LUAD患者信息如下: 性别:男性53例,女性37例;年龄:小于等于65岁有53例,大于 65 岁有 37 例,中位年龄为 64 岁;TNM 分期: I 期 31 例,Ⅱ期14例,Ⅲ期26例,Ⅳ期19例;T分期:T1期42例,T2期31例,T3期12例,T4期5例;N分期:N0期36例,N1期18例,N2期34例,N3期2例;M分期:M0期72例,M1期18例;淋巴管浸润:阴性57例,阳性33例;血管侵犯:阴性52例,阳性38例;神经侵犯:阴性87例,阳性3例;胸膜侵犯:阴性58例,阳性32例;气腔播散:阴性48例,阳性42例;Ki67表达:37例表达小于等于50%,53例表达大于50%. 结果： 生物信息学分析结果:根据ANLN表达中位数将LUAD患者分组并进行分析,分析结果表明 ANLN 在 LUAD 中具有预后价值.LUAD患者中1、3年生存率的曲线下面积分别为0.669和0.651,显示了 ANLN 表达具有较为良好的预测效果.ANLN 与临床相关性分析显示其在年龄、临床分期、T分期和N分期具有显著差异.构建了列线图来预测 LUAD 患者在 1、3、5 年的生存率,校准曲线显示出其具有良好的预测性能.对与 ANLN 相关性较强的几个基因进行了分析,挖掘出了潜在的作用基因.进行富集分析、免疫细胞浸润、免疫治疗反应、药物敏感性分析、突变景观和肿瘤微环境等分析,挖掘出ANLN在LUAD发展中的机制. IHC结果:通过IHC检测了LUAD中ANLN的表达水平,结果显示,在90例LUAD组织中,37例(41.1%)ANLN表达阴性,53例(58.9%)ANLN表达阳性.随后,验证了ANLN与TNM分期和病理信息的相关性.结果显示如下: 1. ANLN表达在TNM分期中具有差异(χ2 = 19.731,Plt;0.001); 2. ANLN 表达在 N 分期中具有差异(Plt;0.001); 3. ANLN 表达在 M 分期中具有差异(χ2 = 5.553,P=0.03); 4. ANLN 表达在淋巴管浸润中具有差异(χ2 = 31.211,Plt;0.001); 5. ANLN 表达在血管侵犯中具有差异(χ2 =34.911,Plt;0.001); 6. ANLN 表达在胸膜侵犯中具有差异(χ2 =13.322,Plt;0.001); 7. ANLN 表达在气腔播散中具有差异(χ2 = 15.835,Plt;0.001); 8. ANLN 表达在 Ki67 表达中具有差异(χ2 = 31.005,Plt;0.001); 9. ANLN 表达在 T 分期(P=0.103)、神经侵犯(P=0.266)、性别(χ2 = 2.721,P=0.129)和年龄(χ2 = 0.927,P=0.388)中无显著差异. 结论： 生物信息学结果显示ANLN是LUAD独立预后因素.构建了结合ANLN表达量和临床信息的列线图,用于预测LUAD患者的预后情况.富集分析、免疫细胞浸润、免疫治疗反应、药物敏感性分析、体细胞突变和肿瘤微环境等方面的分析结果显示,ANLN 在 LUAD发展中具有关键作用. IHC 验证结果显示 ANLN 表达与 LUAD 患者的 TNM 分期、N分期、M分期、淋巴管浸润、血管侵犯、胸膜侵犯、气腔播散和Ki67表达显著相关.证实了ANLN在LUAD患者的临床应用中具有价值,可以成为LUAD分期、预后评估和治疗方案制定中的辅助指标.
NETL