摘要
随着水产养殖业的高速发展，在养殖过程中出现了许多问题，因此功能性饲料添加剂的开发变得尤为重要。本研究评估了桑叶提取物作为天然饲料添加剂对花鲈（Lateolabrax maculatus）生长性能、免疫和肝肠功能的影响。试验方法如下：将试验花鲈暂养两周后，选择体质健康（平均体重为 9.00±0.02 g）的花鲈 360 尾，将其随机分为 6 个处理组，3 次重复，并分别放入 18 个 200 L 的试验缸中，每个试验缸放置 20 尾。每天分别饱食投喂粗蛋白含量为 48%，粗脂肪含量为 8.6%的不同添加浓度（0、3、6、9、12、15 g/kg）的试验饲料，并在水温为25-28℃，盐度为0.5-1的条件下进行52天的养殖试验。养殖结束后，随机选取9尾鱼采集其头肾、肝脏、肠道和血清用于生理生化指标检测、组织切片制备与观察以及转录组学分析。试验结果如下： （1）桑叶提取物对花鲈生长、免疫和抗氧化能力的影响 试验结果显示，与对照组相比，日粮中添加 9 g/kg 桑叶提取物能够显著增加花鲈的增重率、特定生长率（P＜0.05）。当桑叶提取物添加量为 3、6、9 g/kg 时，花鲈日摄食量显著增加（P＜0.05）。与对照组相比，桑叶提取物显著提高了血清中的IgM含量，且在桑叶提取物添加量为6g/kg时达到最高（P＜0.05）。桑叶提取物对血清ACP、AKP、LZM、补体C3、TP无显著影响（P＞0.05）。与对照组相比饲料中添加桑叶提取物对花鲈头肾ACP和AKP活性无显著影响（P＞0.05）。与对照组相比，桑叶提取物显著提高了血清中CAT、SOD活性和GSH水平，并显著降低了血清中MDA的含量（P＜0.05）。桑叶提取物对花鲈血清中T-AOC无显著影响（P＞0.05）。与对照组相比，桑叶提取物对花鲈头肾SOD活性、T-AOC和MDA含量也均无显著影响（P＞0.05）。通过转录分析发现，桑叶提取物主要通过直接或间接影响色氨酸代谢来调控花鲈头肾的免疫机能。然而，桑叶提取物对花鲈头肾中3-羟基邻氨基苯甲酸3,4-双加氧、β-1,4-N-乙酰氨基半乳糖转移酶3、鞘磷脂磷酸二酯酶、MHC I类抗原和免疫球蛋白重链等基因的表达量无显著性影响。以上结果表明，桑叶提取能够。以上结果表明，桑提取物能够提高花鲈的生长性能，且在其添加量为 9 g/kg 时效果最佳，且在一定程度上提高花鲈血清和头肾抗氧化能力和非特异性免。 （2）桑叶提取物对花鲈肝脏功能的影响 试验结果表明，与对照组相比，桑叶提取物显著增加了花鲈肝脏LPS、TRS活性，且在桑叶提取物添加量为 6 g/kg 时达到最高（P＜0.05）。桑叶提取物显著提高了肝脏组织中参与代谢过程的 LDH、GOT 活性，且在桑叶提取物添加量为 9 g/kg 时 GOT 活性达到最高，桑叶提取物添加量为 15 g/kg 时 LDH 活性达到最高（P＜0.05）。桑叶提取物对肝脏抗氧化酶无显著影响（P＞0.05），但肝脏中 MDA 的含量显著降低（P＜0.05）。与对照组相比，桑叶提取物显著增加了花鲈肝脏中 AKP 和 ACP 活性，且当桑叶提取物添加量为3 g/kg时 AKP 活性达到最高，9 g/kg 时 ACP 活性达到最高（P＜0.05）。桑叶提取物对花鲈血清中GPT和GOT活性无显著影响，但具有一定降低趋势（P＞0.05）。通过比较转录组学分析发现，桑叶提取物能够通过提高参与代谢过程的磷脂酸磷酸酶、葡萄糖醛酸转移酶、肌醇加氧酶、碳酸酐酶、细胞色素c氧化酶亚单位2等基因的表达量来增强花鲈肝脏的脂肪和碳水化物代谢能力。桑叶提取物也能够通过提高参与机体免疫过程的信号转导子和转录激活子1、ATP依赖性RNA解旋酶DHX58和C-X-C基序趋化因子9的表达量来影响花鲈肝脏的免疫能力。以上结果表明，桑叶提取物能够通过提高花鲈肝脏中消化酶活性、代谢酶活性以及肝脏代谢和免疫调控基因表达量来增强花鲈肝脏消化、代谢、免疫能力。但桑叶提取物对花鲈肝脏抗氧化能力和肝脏损伤影响不明显。 （3）桑叶提取物对花鲈肠道功能的影响 试验结果表明，日粮中添加 9 g/kg 桑叶提取物可提高肠道 TRS、AMS 和 LPS 活性（P＜0.05）。与对照组相比，桑叶提取物对花鲈肠道LDH、GPT、GOT活性无显著影响，但均具有一定增加趋势（P＞0.05）。添加3 g/kg桑叶提取物可提高肠道CAT活性（P＜0.05），但对肠道SOD活性和GSH、MDA的含量影响不显著（P＞0.05）。桑叶提取物还能够改善花鲈肠道组织形态，表现为肠绒毛长度的显著增加，从而增加了肠道消化吸收面积（P＜0.05）。与对照组相比，饲粮中添加桑叶提取物显著提高了花鲈肠道微生物ACE、Chao1和Shannon指数（P＜0.05）。桑叶提取物还提高了花鲈肠道中优势菌群丰度，从而改善肠道微生物组成。通过比较转录组学分析发现，桑叶提取物能够通过上调花鲈肠道中参与机体代谢过程的醚脂质代谢通路中外核苷酸焦磷酸酶/磷酸二酯酶家族成员 6 的表达量对花鲈肠道代谢产生影响。桑叶提取物也能够通过上调了参与机体免疫过程中的嘌呤核苷磷酸化酶、γ-谷氨酰水解酶、转录因子AP-1、C-C基趋化因子24、含有caspase募集结构域的蛋白质8的表达量和参与机体抗氧化过程中过氧化物-5的表达量来影响花鲈肠道免疫和抗氧化过程。由以上结果可见，日粮中添加的桑叶提取物可改善花鲈肠道抗氧化能力、肠道组织形态和微生物组成，并能够通过提高花鲈肠道中有关代谢和免疫相关基因的表达量，从而改善花鲈的肠道功能。
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