摘要
目的: 偏头痛是一种常见的血管神经性疾病，发病机制尚不明确，现有治疗药物临床效果有限，不良反应明显。因此，有必要研究传统中药及活性成分防治偏头痛作用。依据古籍文献和临床研究报道，土茯苓具有良好的防治偏头痛作用，但现代中药书籍中没有相关功能介绍，也没有相关药效学研究及物质基础研究。为此，本课题拟探讨土茯苓防治偏头痛作用及活性成分，并将活性成分制备成纳米囊泡，以提高活性成分生物利用度，增强其临床疗效。 方法: 通过文献研究，调查土茯苓防治偏头痛临床应用情况;采用网络药理学和分子对接方法，对土茯苓治疗偏头痛的活性成分和潜在靶点进行研究;通过HPLC、液相-质谱联用方法对土茯苓活性成分及入脑成分进行检测;以落新妇苷含量为评价指标，通过正交试验优化土茯苓水煎液提取落新妇苷工艺;采用乙醇注入法制备落新妇苷囊泡，并优选落新妇苷囊泡最佳制备工艺;通过行为学实验和慢性偏头痛小鼠模型对土茯苓水煎液和落新妇苷囊泡进行药效学研究。 结果: 1.临床总计有数百例土茯苓防治偏头痛病例报道，临床结果显示土茯苓对各种头痛均有良好疗效。 2.结合网络药理学分析，从数据库中筛选出土茯苓的活性成分及其与偏头痛的共同靶点，共获得450个土茯苓活性成分靶点和3788个偏头痛相关基因，确认了223个交集靶点。分子对接实验验证了落新妇苷等活性成分与关键靶点之间的强结合作用。网络药理学分析结果表明，土茯苓具有防治偏头痛作用。 3.脑组织药物化学分析表明，脑组织中存在落新妇苷。落新妇苷参与了中枢镇痛过程，因此，落新妇苷应是相关功能成分。 4.采用正交试验对土茯苓水煎液中落新妇苷的提取工艺进行优化，最佳提取工艺为:6倍量纯水，提取温度80℃,提取次数2次，提取时间2h,根据最佳工艺得到的土茯苓水煎液中含量为7.90mg/g。 5.落新妇苷囊泡的最佳工艺为:吐温-80140mg、卵磷脂50mg、胆固醇5mg、落新妇苷4mg,水化温度50℃,转速500r/min。所得囊泡粒径均匀，为118.30±1.04nm,并在人工胃液和人工肠液中显示出良好的稳定性。与游离落新妇苷相比，落新妇苷囊泡显著提高了其在小鼠体内的生物利用度。 6.土茯苓水煎液、落新妇苷囊泡对乙酸和热板诱发的疼痛，均表现出不同程度的抑制作用，表明其具有良好的镇痛作用;通过硝酸甘油腹腔注射致慢性偏头痛小鼠模型，落新妇苷囊泡给药后小鼠挠头次数明显降低，血浆NO、CGRP以及脑组织5-HT的含量趋于正常;落新妇苷囊泡的治疗效果优于落新妇苷组和土茯苓组，初步证实了土茯苓及落新妇苷防治偏头痛的作用。 结论: 本课题综合运用网络药理学、脑组织药化、多指标药效学评价等方法，系统研究了土茯苓及其活性成分落新妇苷囊泡防治偏头痛的作用。研究结果表明，土茯苓及其活性成分落新妇苷具有防治偏头痛的作用，验证了土茯苓临床防治偏头痛的功能报道，为土茯苓新功能提供了依据，为土茯苓进一步开发和临床应用提供了科学依据，为偏头痛防治研究提供新思路。
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