摘要
甜瓜（CucumismeloL.）在国内外广泛栽培，是非常重要的园艺作物。甜瓜枯萎病是一种土传病害，该病严重影响甜瓜产量，造成了巨大的经济损失。本试验以甜瓜‘F-207’（感枯萎病）为母本和‘F-208’（抗枯萎病）为父本构建六世代群体，根据苗期人工接种甜瓜枯萎病菌，明确其遗传规律，利用混池测序获得甜瓜抗枯萎病基因的初定位区间，在区间内加密标记应用于扩大的F2群体，筛选获得隐性重组单株，从而完成精细定位。利用基因功能注释、序列比对和表达分析等方法预测候选基因。研究结果如下： 1.对甜瓜枯萎病病原菌进行形态学鉴定确认其为尖孢镰刀菌，利用四个鉴别寄主对该病菌小种的类型进行研究，发现该病菌为甜瓜尖孢镰刀菌生理小种0。对110份甜瓜种质资源进行苗期抗病性鉴定，筛选获得35份高抗材料、2份抗病材料、2份中抗材料、2份感病材料和69份高感材料。 2.利用感病材料‘F-207’（P1）和抗病材料‘F-208’（P2）构建六世代群体，通过接种甜瓜枯萎病菌，发现P1表现为感病，P2、正反交F1和BC1P2群体均表现为抗病，F2群体中抗病和感病的株数符合3:1的分离比，BC1P1群体中抗病和感病的株数符合1:1的分离比。因此本试验甜瓜抗枯萎病是由单显性基因控制的质量性状，该基因命名为Fom-6。 3.利用BSA-Seq法将候选基因定位到9号染色体0-3,890,000bp，总长度为3.89Mb。利用亲本重测序数据开发InDel标记，选取10对多态性引物用于筛选F2群体的重组单株，最终将基因Fom-6定位在标记C28和C35之间，物理距离为329.48kb。然后利用扩大的F2群体2203个单株和7对多态性引物，将Fom-6基因定位在标记C92和C95的53.35kb区间内。 4.根据甜瓜基因组（v3.6.1）注释信息，该区间内包含4个基因。通过基因功能注释、序列分析和表达分析，推测MELO3C022146.2为控制甜瓜枯萎病的基因，为TIR-NBS-LRR类型的抗病基因。 5.利用110份甜瓜种质材料对InDel标记C95进行验证，基于标记筛选结果和苗期接种鉴定结果表明分子标记C95准确率达到88.18%，可辅助用于甜瓜抗病育种工作。
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