摘要
研究目的:胃癌是常见的消化道恶性肿瘤，其发病隐匿，多数患者就诊时已处于晚期,严重限制了手术治疗效果。胃癌的新辅助治疗包括放化疗、靶向治疗和免疫治疗，放化疗过程中产生的耐药性大大降低了药物疗效，本文旨在研究干扰素基因刺激因子(STING)激动剂环二腺苷酸(c-di-AMP)与人参皂苷(RG3)联合作用对顺铂(DDP)耐药型胃癌(GC)细胞演进的抑制作用，为临床治疗DDP耐药型胃癌提供新的治疗靶点。 材料方法:1.WesternBlot实验检测激活SGC-7901/DDP细胞中STING信号通路所需STING激动剂c-di-AMP的最低剂量。2.MTT实验及克隆形成实验检测STING激动剂和RG3联合使用对SGC-7901/DDP细胞增殖能力的影响。3.细胞划痕实验、Transwell实验和微管形成实验检测STING激动剂和RG3联合使用对SGC-7901/DDP细胞迁移、侵袭及微管形成能力的影响。4.流式细胞术和Hoechst33342荧光染色法检测STING激动剂和RG3联合使用时对SGC-7901/DDP细胞凋亡的影响。5.WesternBlot实验和免疫荧光实验检测STING激动剂和RG3联合使用时对SGC-7901/DDP细胞上皮-间质转化(EMT)的影响。6.WesternBlot实验和免疫荧光实验检测STING激动剂和RG3联合使用时对SGC-7901/DDP细胞干性特征的影响。7.WesternBlot实验和免疫荧光实验检测STING激动剂和RG3联合使用时对SGC-7901/DDP细胞耐药相关蛋白表达的影响。8.建立小鼠异种移植瘤模型，观察STING激动剂和RG3联合使用对肿瘤的抑制作用，用免疫组织化学染色法检测肿瘤相关标志物的表达。 结果:1.WesternBlot实验结果显示，与GES-1细胞、SGC-7901细胞相比，SGC-7901/DDP细胞中STING表达降低。2.MTT实验及克隆形成实验结果显示，STING激动剂与RG3联合使用可抑制SGC-7901/DDP细胞的增殖能力。3.细胞划痕实验、Transwell实验、微管形成实验和WesternBlot实验结果显示，STING激动剂与RG3联合使用可抑制SGC-7901/DDP细胞的迁移、侵袭及血管形成能力。4.流式细胞术、Hoechst33342荧光染色法及Westernblot实验结果显示，STING激动剂与RG3联合使用可促进SGC-7901/DDP细胞的凋亡。5.WesternBlot实验和免疫荧光实验结果显示，STING激动剂与RG3联合使用可抑制SGC-7901/DDP细胞的EMT进程及细胞干性。6.WesternBlot实验和免疫荧光实验结果显示，STING激动剂与RG3联合使用可下调SGC-7901/DDP细胞中耐药相关蛋白的表达。7.动物体内实验结果显示，STING激动剂与RG3联合使用可抑制顺铂耐药型胃癌的恶性进展并逆转其顺铂耐药性。 结论:1.STING激动剂可激活SGC-7901/DDP细胞中的STING信号通路，协同RG3抑制肿瘤细胞的增殖、迁移、侵袭及血管生成能力。2.STING激动剂协同RG3促进SGC-7901/DDP细胞凋亡。3.STING激动剂协同RG3抑制SGC-7901/DDP细胞的干性及EMT进程，下调SGC-7901/DDP细胞中耐药相关蛋白的表达。4.STING激动剂协同RG3在体内抑制顺铂耐药型胃癌恶性进展并逆转其顺铂耐药性。
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