摘要
研究背景: 胃癌(GastricCancer)是世界上第五大常见的癌症，并且有第三大癌症致死率。慢性萎缩性胃炎与胃癌的发生发展存在着密不可分的关系，若不及时治疗，胃黏膜萎缩可能进展为肠化生、异型增生甚至胃癌。然而，目前临床上并没有针对慢性萎缩性胃炎的特效药物，因此，亟待探索一种新的治疗方式来阻止慢性萎缩性胃炎的进一步发展。 间充质干细胞是一类具有多向分化能力以及自我更新能力的多能干细胞，近年来，在治疗炎症性疾病、自身免疫性疾病、促进伤口愈合等方面都表现出了惊人的潜力。其中，人脐带间充质干细胞由于其易获得、增殖能力强等优势，更是受到了国内外众多学者的广泛关注。国际上有关于间充质干细胞治疗临床疾病的研究已经进行了数十年，但是关于其应用于慢性萎缩性胃炎的报道几乎不存在。 外泌体由细胞分泌的具有双层脂质膜的囊泡，被认为是细胞间通讯的载体，它的存在对于细胞发挥其生物学功能具有至关重要的作用。间充质干细胞内的生物活性脂质、核酸等均可以通过外泌体被运输到靶细胞。外泌体是MSCs旁分泌的重要成分，越来越多的研究表明MSCs来源的外泌体可以作为MSCs旁分泌作用的替代疗法。因此，探索人脐带间充质干细胞及其外泌体对于慢性萎缩性胃炎的疗效及其机制，有望为临床上治疗慢性萎缩性胃炎提供新的思路。 研究目的: 旨在明确人脐带间充质干细胞对于慢性萎缩性胃炎的疗效并探讨人脐带间充质干细胞对慢性萎缩性胃炎发挥治疗作用的机制。 研究方法: 1.这项研究纳入了2020年8月至2023年8月在山东省立医院消化内科接诊，既往接受过慢性萎缩性胃炎常规治疗且无明显效果，并自愿接受人脐带间充质干细胞胃黏膜下多点注射治疗的14名慢性萎缩性胃炎患者，全部患者接受治疗时HP均为阴性。每名患者共接受干细胞注射两次，间隔时间一个月。每次治疗前以及完成治疗后一年收集患者胃部的病理标本、血清以及规范拍摄胃镜下图像，并记录患者消化不良症状的严重程度。完成治疗一年后，以组织病理学改变、胃功能三项血清学指标、消化不良症状、胃镜下木村-竹本分型为结局指标，使用Wilcoxon符号秩检验对治疗前后的指标进行统计学分析。 2.本研究利用MNNG诱导慢性萎缩性胃炎小鼠模型，通过尾静脉分别注射人脐带间充质干细胞、人脐带间充质干细胞外泌体进行治疗。利用获取的组织制作病理切片并进行HE染色，同时留取新鲜血清检测胃功能血清学三项指标，提取组织RNA、蛋白备用。 3.利用生物信息学分析、WesternBlot、双荧光素酶报告基因实验、qRT-PCR、EDU、慢病毒包装与转染等技术，验证人脐带间充质干细胞外泌体发挥作用的具体分子机制。 研究结果: 1.接受人脐带间充质干细胞治疗后，CAG患者胃角处的萎缩程度明显逆转、消化不良的症状明显改善。2.与疾病对照组相比，接受人脐带间充质干细胞或其外泌体治疗的慢性萎缩性胃炎小鼠胃粘膜的萎缩程度明显更低、自噬水平更高、凋亡水平更低，且人脐带间充质干细胞治疗组与人脐带间充质干细胞外泌体治疗组之间无明显差异。3.miR-26a-5p在CAG中低表达、PDE4B在CAG中高表达;CAG与人脐带间充质干细胞外泌体共培养后，miR-26a-5p的表达水平明显升高，并且miR-26a-5p可以直接敲低PDE4B在CAG中的表达水平;在CAG中敲低PDE4B后，CAG的自噬水平明显升高、STAT3通路激活水平明显受到抑制。 研究结论: 我们的研究证明，人脐带间充质干细胞及其外泌体对慢性萎缩性胃炎具有明显的治疗效果，其作用可能与外泌体输送miR-26a-5p调控PDE4B,影响自噬以及STAT3通路的激活水平有关。
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