摘要
背景与目的:变应性鼻炎是一种耳鼻咽喉科的常见疾病，其发病机制为IgE介导的Ⅰ型变态反应。现有研究表明，脑源性神经营养因子（brain-derivedneurotrophicfactor,BDNF）是一种神经肽，参与气道变态反应，增加气道阻力及神经高反应性，并在肺灌洗液及鼻灌洗液中表达上调。人鼻黏膜来源上皮细胞气-液相培养模型中，观察到细胞内BDNF表达在炎症因子的刺激下明显增加，并向基底外侧分泌。在变应性鼻炎患者的鼻黏膜中，BDNF主要表达于上皮细胞及固有层炎性细胞中。鼻腔黏膜被覆假复层纤毛柱状上皮，其中最主要且数量最多的是纤毛细胞。本研究的目的为探究鼻黏膜纤毛细胞中BDNF的表达模式，以及变应性鼻炎状态下纤毛细胞中BDNF的表达变化。 方法:第一部分，收集变应性鼻炎患者的变应原检测结果及变应性鼻眼症状视觉模拟评分量表（VAS评分）;鼻拭子收集上皮细胞制备离心涂片，免疫荧光染色观察BDNF在纤毛细胞中的表达及定位;ELISA检测部分患者鼻灌洗液中BDNF表达水平;RT-PCR检测部分患者鼻黏膜组织中BDNF与IL-4/5/13的表达。第二部分，使用卵清蛋白建立变应性鼻炎小鼠模型，分为变应原末次激发后3小时组、6小时组、12小时组、24小时组及对照组。收集小鼠鼻黏膜上皮细胞，免疫荧光染色观察BDNF在纤毛细胞中表达的变化;ELISA检测小鼠血清中的IgE以及血清和鼻灌洗液中的BDNF表达水平;RT-PCR检测小鼠鼻黏膜组织BDNF与IL-4/5/13的表达。 结果: 1.变应性鼻炎组患者的纤毛细胞中，BDNF的平均荧光强度显著低于正常对照组，且与鼻眼症状VAS评分呈负相关。 2.将BDNF在人鼻上皮纤毛细胞中的定位分为5类:近细胞核聚集表达模式（Ⅰ）、细胞核-纤毛间不均匀表达模式（Ⅱ）、胞质内均匀表达模式（Ⅲ）、纤毛区高表达模式（Ⅳ）、胞质内稀疏表达模式（Ⅴ）。5类表达模式在变应性鼻炎组及正常对照组的占比有差异，且差异有统计学意义。 3.变应性鼻炎患者鼻灌洗液中BDNF表达上调，与鼻眼症状VAS评分呈正相关。 4.变应性鼻炎患者鼻黏膜组织中BDNF、IL-4/5/13的mRNA相对表达上调，其中BDNF与IL-13存在正相关。 5.在变应性鼻炎小鼠模型中，小鼠血清和鼻灌洗液中BDNF表达浓度分别在变应原激发后3小时及6小时有一过性增高。纤毛细胞中BDNF的平均荧光强度在变应原激发后3、6、12小时组有显著增高，与对照组的组间差异有统计学意义。24小时组下降至对照组水平。 6.小鼠鼻黏膜组织中BDNF、IL-4/5/13在变应原激发后3小时组或6小时组显著升高。随时间下降，24小时组与对照组比较无统计学差异。 结论:本研究首次观察变应性鼻炎患者纤毛细胞中BDNF表达和定位模式，在变应持续状态下表达水平低于正常对照组。此外，我们通过变应性鼻炎小鼠模型证实BDNF在变应原激发后随时间变化有短暂的表达增加，24小时后下降至对照组水平。这可能是血清及鼻灌洗液中BDNF一过性增高的原因之一。
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