摘要
黑果腺肋花楸果营养价值高，含有原花青素、维生素C、黄酮和皂苷类等多种活性成分，具有良好的抗氧化、降血糖、护肝、抗肿瘤等生理活性。以黑果腺肋花楸果中原花青素提取物为主要原料制备成分散片，对黑果腺肋花楸果中原花青素的提取工艺和纯化工艺及分散片的制备工艺、质量标准和生物活性进行系统研究，为进一步开发利用黑果腺肋花楸果提供试验参考。 选用柱层析循环联合法提取黑果腺肋花楸果中原花青素和维生素C，通过单因素试验，确定最佳的提取工艺:提取溶剂分别为40%乙醇水溶液和纯水，吸涨率分别为2.6 mL/g、3.2 mL/g，浸泡平衡时间分别为3 h、2 h。在以上条件下，经乙醇-水体系柱层析循环联合提取的黑果腺肋花楸果原花青素及维生素C，提取率均可达到95%以上，收率较为稳定。通过体外活性试验表明，黑果腺肋花楸果原花青素和维生素C提取物均具有一定的抑制黄嘌呤氧化酶、体外清除亚硝酸盐和抗氧化的效果。 通过吸附、解吸实验，探究聚酰胺树脂对黑果腺肋花楸果中各活性成分的纯化效果，黑果腺肋花楸果原花青素、总皂苷、总黄酮和维生素C的最佳纯化工艺条件: 黑果提取液上柱液的生药浓度为43.2 mg/mL；提取液的上样体积与树脂质量之比(mL/mg)为17.3:1；吸附流速控制在1.0~1.5 mL/min范围内；维生素C、低聚和高聚原花青素的解吸溶剂分别0%、40%、60%的乙醇水溶液，总皂苷和总黄酮用80%乙醇共同洗脱；解吸流速控制在1.0~1.5 mL/min范围内；解吸液体积与树脂质量之比(mL:mg)为15:1。在此条件下，进行工艺验证实验，低聚、高聚原花青素、总皂苷、总黄酮和维生素C平均吸附率分别为94.77%、94.77%、89.04%、91.88%、90.51%；平均解吸率分别为60.77%、32.90%、94.14%、93.50%、95.55%。经此工艺纯化后，干浸膏中原花青素、总皂苷、总黄酮和维生素C的含量分别由20.37%提高到64.43%、25.43%提高到88.18%、2.26%提高到8.45%、6.20%提高到14.22%。 黑果腺肋花楸果低聚、高聚原花青素释放量在模拟胃消化 0~2.5 h 和肠消化0~3.0 h内，不断增加到9.64、4.65 mg/g 和 23.24、8.11 mg/g，表明胃蛋白酶、胆汁和胰酶对不同聚合度原花青素的释放具有良好的促进作用，与高聚原花青素相比，低聚原花青素能发挥更良好的生理活性。体外活性试验结果显示，经过聚酰胺树脂纯化后的黑果腺肋花楸果不同聚合度的原花青素、维生素C、总黄酮和总皂苷等活性成分，均展现出了强于粗提物的生物活性能力，其纯化物对人体内亚硝酸盐和黄嘌呤氧化酶均具有更强的清除或抑制能力和抗氧化能力。 经过单因素和正交试验优化后的分散片制备工艺为:以黑果腺肋花楸果原花青素浸膏粉为原料，微晶纤维素为稀释剂，交联聚乙烯吡咯烷酮为崩解剂，甜菊苷为矫味剂，75%乙醇为粘合剂，微粉硅胶为润滑剂，经制粒、干燥、整粒、压片，制成分散片，经此工艺制备的黑果腺肋花楸果原花青素分散片符合《中国药典》的相关规定。 采用UV法测定黑果腺肋花楸果原花青素分散片中原花青素和总三萜的含量，并进行方法学研究，黑果腺肋花楸果原花青素分散片中原花青素和总三萜的含量分别为79.50、12.87mg/片；采用UPLC法测定黑果腺肋花楸果原花青素分散片中没食子酸、儿茶素、表儿茶素的含量，并进行方法学研究。黑果腺肋花楸果原花青素分散片中没食子酸、儿茶素、表儿茶素的含量分别为36.68、313.08、199.22μg/片。通过体外抗氧化试验结果表明，黑果腺肋花楸果原花青素分散片具有一定的清除DPPH·自由基和抗脂质体过氧化的能力，但效果弱于维生素C。
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