摘要
本文从以下两部分进行阐述： 选择性JAK3共价抑制剂和基于药效团融合抗真菌唑类化合物的设计、合成及其生物活性评价 第一章选择性JAK3共价抑制剂的设计、合成及生物活性研究 目的：JAK家族亚族成员JAK3作为自身免疫性疾病治疗的优势靶点受到广泛关注，但由于上市的JAK3抑制剂实为泛JAK抑制剂，其广谱的细胞因子抑制导致严重的不良反应而被FDA要求更新安全警告，因此，选择性的JAK3抑制剂仍是研究热点。在前期工作中，先导化合物RB1对JAK3(IC50=40nM)具有良好的抑制活性，基于其活性仍然存在改善空间以及与JAK3蛋白活性口袋尚未作用的疏水口袋的发现，在RB1的吡咯位置上引入芳香环官能团，以增加疏水作用，加强配体和受体之间的相互作用，提高抑制剂的选择性和活性，减少泛选择和脱靶造成的毒性。 方法：以7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶为起始化合物，通过偶联反应在吡咯环一侧引入不同的疏水性基团来探究对活性及选择性的影响。得到的系列化合物在激酶活性测试、细胞毒性试验、肝微粒体代谢测试及ICR小鼠抗炎活性测试下，选出候选化合物，来进一步测试化合物其药物代谢动力学，急性毒性试验以及CIA模型小鼠中治疗关节炎的疗效。 结果：通过向RB1引入各种疏水性芳香族片段，合成了一系列的JAK3共价抑制剂。其中，J1b(JAK3IC50=7.2nM,其他JAKs IC50＞1000nM)的活性及选择性表现突出，不仅在细胞和小鼠中表现低毒性(MTD＞2g/kg)，而且能促进淋巴细胞凋亡，在ICR小鼠试验中也显示出很好的抗炎活性。另外，可接受的生物利用度(F％=31.69％)和半衰期(t1/2=3.77h)使J1b在CIA模型中显示出优异的抗炎活性，特别是在高剂量治疗(60mg/kg)下可明显降低临床评分并保护关节组织，避免小鼠关节炎症进一步的恶化。 结论：明确的激酶选择性以及良好的成药性质，J1b可作为选择性的JAK3共价抑制剂，用于关节炎和其他免疫性疾病的治疗研究。 第二章抗真菌唑类化合物的设计、合成及生物活性研究 目的：侵袭性深部真菌感染是困扰医疗界的一个难题，其病发率以及死亡率连年的上升趋势使其成为对人类的健康的一大挑战。氮唑类作为使用最为广泛的深部抗真菌药物，长期以及重复的给药也造成了耐药菌的出现。研究发现小檗碱具有抗真菌药物的增效作用，且对氟康唑的抗真菌增效作用尤为显著。在本文将协同抗耐药增效剂小檗碱的药效团引入到氮唑类上，并测试相关抗真菌活性。 方法：以ω-氯代-2,4-二氟苯乙酮为起始原料，通过亲核取代、环氧化和酰胺缩合反应引入小檗碱的药效团得到目标化合物。目标化合物在经过抗白色念珠菌的筛选后，抑菌效果较好的化合物则被挑选进一步测试它们的广谱抗菌及抗耐药菌的活性。 结果：设计及合成了五个系列化合物，在抗白色念珠菌筛查中，发现伏立康唑系列和伯沙康唑系列引入小檗碱衍生物的药效基团胡椒环，特别是含双键侧链的化合物，都表现出活性(MIC≤0.008μg/mL)效果优于氟康唑(MIC=0.5μg/mL)。其中，优选化合物D1和D3不仅具有广谱的抗真菌，而且其抗耐药真菌的活性优于氟康唑，但与伏立康唑相当。 结论：基于分子杂交原理将抗真菌协同增效剂小檗碱衍生物与唑类抗真菌药物的关键药效团融合，获得了具有广谱的抗真菌活性化合物D1和D3,初步活性证明化合物D1和D3具有一定的抗耐药菌的潜力。这也为利用自我协同策略的药效团融合在抗真菌药物设计的可行性提供了一定的参考价值。
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