摘要
目的:本研究通过鸡胚蛋(孵化13天)外敷干预肩袖损伤延迟修复的小鼠模型,评估小鼠术后冈上肌腱骨愈合情况,探讨鸡胚蛋发挥的作用及有效机制。 方法:共C57小鼠70只,随机选取25只为空白组,剩余45只全部造模。造模6周后各选取5只进行GAT-100步态分析,数据收集过后取冈上肌称重、HE染色及油红-O染色验证模型;后再次造模缝合冈上肌腱,将造模成功的小鼠随机各20只分为对照组和实验组,10天后实验组给予鸡胚蛋外敷干预1周、3周,各组每次选取5只做步态分析后处死取肱骨-冈上肌腱-肩胛骨复合体行生物力学测试,另选取5只做复合体的组织切片染色及周围关节囊骨形态发生蛋白-2(BMP-2)和基金属蛋白酶-9(MMP-9)的Elisa含量测定。 结果:1.模型评价:步态分析显示第一阶段造模6周后步态参数均具有统计学差异(P<0.05);模型小鼠的肌肉湿重减轻约20%;组织切片显示环形脂肪细胞、肌束间隙变大及红染的脂肪组织。 2.GAT-100步态分析:干预1周和3周后,对照组与其余两组的步长、步宽有显著差异(P<0.05);峰值站立时最大爪面积在三组间均有统计学差异(P<0.05)。对比1周和3周时对照组步态参数都具有统计学差异(P<0.05);实验组步宽和爪面积有显著差异(P<0.05)。 3.生物力学测试:干预1周空白组与剩余两组均存在统计学差异(P<0.05);干预3周后,组间均有显著差异(P<0.05)。除空白组外其余两组组内比较具有统计学差异(P<0.05)。 4.组织切片观察:实验组和对照组3周较1周在HE染片及Masson染片中成纤维细胞及胶原纤维都有所增加,且实验组更规则,腱骨愈合状态更好;油红-O染色显示脂肪红染区域实验组3周较1周变少,且明显少于对照组。 5.BMP-2、MMP-9蛋白含量的Elisa检测:干预1周后实验组与其他两组BMP-2含量有差异(P<0.01);MMP-9含量空白组与其余两组差异显著(P<0.01)。干预3周后BMP-2及MMP-9含量三个分组之间均具有统计学差异(P<0.01)。组内比较BMP-2含量均没有差异(P>0.05);MMP-9在对照组和实验组中有显著差异(P<0.05)。 结论:1.鸡胚蛋外敷对肩袖损伤延迟修复的小鼠腱骨愈合具有促进作用,能够有效缓解疼痛,改善功能活动,增加生物力学强度。 2.鸡胚蛋抗氧化作用一定程度上可以减少脂肪变性,从而改善肌腱质量,并且通过升高骨形态发生蛋白2(BMP-2)的含量和抑制基金属蛋白酶9(MMP-9)的产生,从而诱导纤维软骨生长分化,抑制降解功能,从而加快腱骨愈合进程。