摘要
青钱柳三萜酸是改善糖脂代谢紊乱、抑制炎症极具潜力的活性物，其中熊果酸、齐墩果酸、白桦脂酸是青钱柳三萜酸中主要成分。据文献报道，青钱柳三萜酸可通过促进葡萄糖的吸收和摄取、增加糖原的合成、保护磷脂酰肌醇-3激酶/蛋白激酶B/糖原合成激酶（PI3K/AKT/GSK3β）通路等途径调节糖代谢，也可以通过降低脂肪生成、促进脂肪酸β氧化来改善脂代谢。硒甲基硒代半胱氨酸（MSC）是天然的硒甲基化合物，是被国家批准的新型硒源类食品营养强化剂，具有抗氧化、抑制肿瘤、辅助心血管疾病治疗、改善机体免疫力等多种生理功能。本文选取青钱柳三萜酸代表性活性成分熊果酸、齐墩果酸和白桦脂酸，利用响应面设计得到青钱柳三萜酸复配物（TAC），并与MSC复配得到青钱柳三萜酸/硒甲基硒代半胱氨酸（TAC/MSC）复合物，系统开展TAC/MSC复合物糖脂代谢功效及其作用机制研究，开展的主要研究内容和取得的主要研究结果如下： （1）以代表性糖脂消化酶（α-淀粉酶、胰脂肪酶）活性抑制为评价指标，采用响应面法得到青钱柳三萜酸复配物TAC的优化处方，质量比为熊果酸∶齐墩果酸∶白桦脂酸=1∶1.14∶1.01；再将TAC与MSC复配得到TAC/MSC复合物，评价其对不同糖脂消化酶活性的影响。研究表明，TAC/MSC复合物对α-葡萄糖苷酶具有良好的抑制作用，对胰脂肪酶和α-淀粉酶表现出一定的抑制作用。 （2）研究了TAC/MSC复合物体外细胞毒性以及对人肝癌细胞（HepG2）葡萄糖消耗的影响。采用棕榈酸（PA）构建胰岛素抵抗细胞模型，研究TAC/MSC复合物对PA诱导HepG2细胞葡萄糖消耗、糖原合成以及细胞内脂质合成量的影响。细胞实验结果表明，TAC、MSC在实验范围内对细胞生长没有明显影响，PA会显著降低HepG2细胞葡萄糖消耗，TAC/MSC复合物能有效逆转这一现象并提高糖原合成量。细胞内脂质含量检测和油红O染色结果显示，TAC/MSC复合物可有效降低细胞内甘油三酯（TG）、总胆固醇（T-CHO）的含量并减少细胞内脂质沉积。 （3）采用高脂饮食和链脲佐菌素构建C57BL/6雄性小鼠2型糖尿病（T2DM)模型。研究了TAC/MSC复合物对小鼠体重、摄食量、血糖、葡萄糖和胰岛素耐受、血清生化指标以及肝脏活性氧（ROS）的影响。结果表明，TAC/MSC复合物能够改善小鼠体重下降、多食及血糖升高的症状，TAC及TAC/MSC可有效缓解小鼠胰岛素耐受并提高葡萄糖耐受。血清生化指标检测结果显示，与模型组相比，TAC/MSC高剂量组可显著增加血清高密度脂蛋白（HDL-C）含量，降低血清TG、低密度脂蛋白（LDL-C）和T-CHO含量。TAC/MSC高剂量组可以显著增加谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）含量、过氧化氢酶（CAT）、超氧化物歧化酶（SOD）的含量，并显著减少肝脏ROS含量。研究结果表明，TAC/MSC复合物能显著降低小鼠血清脂质并提高T2DM小鼠的抗氧化能力。小鼠组织结构的研究结果表明，TAC/MSC复合物能够改善心肌细胞排列松散的状态，保护胰腺、肾脏结构的完整，还能通过减少肝脏脂质沉积、胶原纤维含量来减轻肝脏病理变化。 （4）研究了TAC/MSC复合物对HepG2和2型糖尿病小鼠肝脏PI3K/AKT/GSK3β通路以及脂肪代谢信号通路的影响。结果表明，TAC/MSC复合物可以在HepG2和2型糖尿病小鼠肝脏中有效上调PI3K、AKT和GSK3β的磷酸化表达，同时增加脂肪动员酶脂肪甘油三酯脂酶（ATGL）、激素敏感脂肪酶（HSL）的表达，下调脂肪酸合成酶（FAS）、固醇调节元件结合蛋白1（SREBP-1c）的表达。 综上所述，TAC/MSC复合物能够有效抑制糖脂代谢酶活性、改善胰岛素抵抗和脂质代谢紊乱。该研究结果为研究开发新型高性能降血糖、调血脂保健食品提供理论和实验依据。
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