摘要
微塑料是海洋环境中普遍存在的新型污染物，近年来有关微塑料与其他污染物复合毒性的研究受到越来越多学者的关注。弧菌是海洋环境中最常见的细菌类群之一，在海洋生态系统中占据优势地位。有研究表明微塑料附载弧菌的过程中，弧菌会在塑料表面形成生物膜，这更利于弧菌的生存及迁移；同时，致病性海洋弧菌对水产养殖发展和人类健康均存在风险，弧菌可能协同微塑料对生物产生复合效应。因此探索微塑料和弧菌之间的附载关系，以及两者复合后对生物的致病性研究具有重要意义。本研究选择海洋中分布广、检出率高的副溶血弧菌（V.p）和常见的几种微塑料（PS、PP、PE、PET）进行人工附载能力实验和牡蛎复合暴露实验，研究两种污染物对香港牡蛎的复合毒性效应。 PET纤维在水环境中对V.p的附载实验表明：短时间内，微生物在微塑料上形成的生物膜数量有限，PET纤维对V.p的人工附载在第9h趋于饱和；PET纤维对V.p的附载受盐度影响，随着盐度（6‰-27‰）的升高，PET纤维微塑料在水环境中对V.p的附载量呈现先上升、趋于平缓后再下降的趋势，在盐度为21‰时微塑料的附载量最高；同时，微塑料特性也影响其对V.p的人工附载能力，不同微塑料形状条件下，PET纤维微塑料比PET颗粒微塑料对V.p的附载能力强；PS、PP、PE、PET四种材质微塑料中，PET对V.p的附载能力最强。 微塑料附载V.p对牡蛎的室内复合暴露实验结果显示：不同的室内暴露方式导致香港牡蛎的病死率出现差异。截止至暴露期最后一天，V.p单独暴露组累积病死率为72.97%，复合暴露组各组平均累积病死率为35.14%且各组病死率均低于V.p单独暴露组，复合暴露组的牡蛎死亡速度得到明显缓解。 不同的暴露方式导致牡蛎被副溶血弧菌感染的程度出现差异。在所有组别中，副溶血弧菌单独暴露组牡蛎组织弧菌浓度整体表现为最高，平均感染浓度为1.39×106CFU/mL；各复合暴露组中V.p+PE颗粒组牡蛎组织弧菌浓度较高，平均感染浓度为6.57×106CFU/mL；V.p+PET纤维组牡蛎组织弧菌浓度最低，平均感染浓度为6.57×105CFU/mL；其余复合暴露组感染浓度从高至低依次为V.p+PS颗粒组5.24×105CFU/mL、V.p+PP颗粒组3.98×105CFU/mL、V.p+PET颗粒组1.56×105CFU/mL。上述结果表明，微塑料的复合降低了牡蛎被副溶血弧菌感染的程度，减缓了牡蛎的病害程度，缓解了弧菌的毒性作用；同时我们发现附着生物膜的微塑料会更容易被牡蛎摄入。 微塑料与V.p的不同暴露方式对牡蛎肝胰腺转录组测序数据的结果显示，以PET纤维为例，各暴露组引起的差异表达基因的功能注释和富集分析有明显差异：PET纤维单独暴露引起了牡蛎细胞外区域和小分子部件相关基因的差异化表达，这些差异基因的作用通路主要包括核糖体、PI3K-Akt信号通路等；V.p单独暴露引起了牡蛎膜固有部分和信号受体结合相关基因的差异化表达，这些差异基因的作用通路主要包括溶酶体、ECM受体相互作用等其他相关通路；PET纤维与V.p复合暴露引起了牡蛎细胞外区和膜部件相关基因差异表达，在细胞组分层面其下调基因的差异化表达尤其显著，它们的差异基因作用通路包括溶酶体、钙信号通路等通路。值得注意的是，微塑料与复合暴露后，并未引起差异基因表达更加多元化。 本文初步了解了广西钦州茅尾海养殖区水环境中弧菌赋存情况，探究了微塑料对V.p的附载能力的影响因素，检测了不同暴露条件下微塑料和V.p两种污染物在牡蛎体内的富集程度，并分析了PET纤维和V.p暴露后牡蛎肝胰腺组织转录组表达差异，为今后评估微塑料和副溶血弧菌对养殖生物的复合毒性效应提供了数据支撑，对养殖生物经济的健康发展具有一定的实际意义。
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