摘要
目的：探讨大鼠肾移植发生急性排斥反应后肠道菌群组成的改变，研究植物乳杆菌L-P28对大鼠肾移植后发生急性排斥时炎症反应、氧化应激水平和肠道菌群的影响。 方法:采用一次性静脉留置针穿刺技术构建大鼠肾移植急性排斥(Acute Rejection, AR)模型。先将大鼠分为假手术组和肾移植组，每组各5只，分别收集术前1天和术后7天的粪便样本和血清样本，16SrRNA技术检测粪便样本分析差异性肠道菌群，靶向代谢组学技术检测血清样本分析差异性短链脂肪酸。使用筛选出的植物乳杆菌L-P28进行后续干预实验，将大鼠随机分为假手术组（sham组)、肾移植组（EG组）和菌粉干预组（L-P28组) ，每组各10只。H.E.染色制备肾脏组织病理切片，评估大鼠肾脏损伤情况。大鼠术后7天血清标本检测肌酐（creatinine，Cre)、尿素氮（blood urea nitrogen,BUN)、超氧化物歧化酶（uperoxide Dismutase，SOD)、谷胱甘肽( glutathione,r-glutamyl cysteingl+glycine,GSH)和丙二醛（Malondialdehyde，MDA)的浓度;ELISA试剂盒检测促炎因子白细胞介素(Interleukin，IL)-lp和抗炎因子IL-10的血清浓度;分别通过实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)及蛋白质印记(Westem-blot)检测大鼠肾脏组织中IL-1p和抗炎因子IL-10的mRNA表达水平和蛋白表达水平；再次用16SrRNA技术检测三组大鼠肠道菌群组成结构。 结果:大鼠肾移植发生的急性排斥反应破坏了肠道菌群的稳态，与假手术组相比，肾移植组大鼠肠道菌群组成中乳杆菌属丰度显著减少，埃希氏志贺氏菌属丰度显著增加，但各组大鼠血清短链脂肪酸水平未见明显差异。病理结果显示，植物乳杆菌L-P28减轻了AR大鼠肾组织炎症细胞浸润和肾间质水肿，肾小管坏死减少。同时，L-P28降低了肾移植AR大鼠尿素氮和血肌酐的浓度。L-P28升高了抗氧化物SOD和GSH的水平并抑制了M DA的氧化应激水平。L-P28能促进大鼠血清中和肾组织中抗炎因子IL-10的表达并抑制促炎因子IL-113的表达。通过L-P28干预的肾移植AR大鼠肠道菌群组成和假手术组相似，且与未做干预的肾移植组相比，菌粉干预组大鼠肠道菌群乳杆菌属丰度增加，埃希氏志贺氏菌属丰度明显减少。 结论：大鼠肾移植后发生急性排斥反应使肠道菌群中乳杆菌属相对丰度减少，埃希氏志贺氏菌属相对丰度增加。补充植物乳杆菌L-P28能抑制大鼠肾移植后发生急性排斥时的炎症反应和氧化应激反应水平，并可能促使肾移植大鼠肠道菌群中乳杆菌属相对丰度的增加和埃希氏志贺氏菌属相对丰度的减少。植物乳杆菌L-P28可能可以为未来临床上缓解肾移植急性排斥造成的肾损伤提供新的思路。
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