摘要
目的： 基于PI3K/AKT信号通路探讨培元定喘汤对卵清蛋白(OVA)诱导的哮喘小鼠模型的作用机制。 方法： 将32只7-8个月龄的BALB/C雌性小鼠随机分成空白组、模型组、培元定喘汤组和地塞米松阳性对照组这4组，每组8只。在实验开始前，对进行适应性喂养1周后。第1天、第8天，将100μg OVA和1mg的氢氧化铝凝胶溶于0.2mL的无菌生理盐水溶液中，对小鼠进行腹腔注射。第16-43天，将1％OVA和生理盐水进行混合，除空白组外，致敏小鼠全部给使用超声雾化箱对雾化液进行雾化吸入，每天1次，每次持续0.5h，此外，在OVA雾化激发前5h前，地塞米松组给予培元定喘汤制剂0.2mL进行灌胃，地塞米松组OVA雾化激发前5h给予地塞米松混悬液1mg/Kg灌胃，空白组给与相同体积的生理盐水溶液灌胃和雾化吸入。记录并观察小鼠的一般形态。最后一次雾化后24h，处死小鼠进行取材。对肺组织切片进行苏木精-伊红(HE)染色后，使用自动切片扫描系统对其进行组织学检测和观察;ELISA法测定BALF中IL-4、IFN-γ炎性因子水平;realtime-PCR法测定肺组织中PI3K、Akt mRNA的表达水平。 结果： 1.HE染色结果：空白组小鼠的肺组织显示无明显病理改变;参照空白组，模型组小鼠的肺组织排列异常、支气管壁增厚、炎性细胞浸润、肺组织损伤(p＜0.05);与模型组相比，地塞米松组和培元定喘汤组小鼠上述病理症状有所缓解，肺部损伤明显减轻(p＜0.05);地塞米松组和培元定喘汤组对比无统计学意义(p＞0.05)。 2.ELISA法检测结果：空白组小鼠BALF中IL-4、IFN-γ炎性因子的表达水平无明显变化;与空白组相比，模型组小鼠BALF中IL-4含量显著增长、而IFN-γ含量显著降低(p＜0.05);与模型组相比，地塞米松组和培元定喘汤组小鼠BALF中IL-4含量降低明显，而IFN-γ含量增高也很明显(p＜0.05);与地塞米松组相比，培元定喘汤IL-4含量比较无统计学意义(p＞0.05)，而IFN-γ含量稍低于地塞米松组(p＜0.05)。 3.realtime-PCR法检测结果：空白组小鼠肺组织中PI3K、Akt mRNA的表达无明显变化;参照空白组，模型组小鼠肺组织中PI3K、Akt mRNA的表达量明显增加(p＜0.05);参照模型组，地塞米松组和培元定喘汤组小鼠肺组织中PI3K、Akt mRNA的表达水平明显受抑制(p＜0.05);地塞米松组和培元定喘汤组之间的对比无统计学意义(p＞0.05)。 结论： 1.培元定喘汤减少小鼠支气管四周的炎性细胞浸润，缓解肺组织炎症反应，改善肺部结构组织损害情况。 2.培元定喘汤能明显降低小鼠血清中IL-4表达量，升高IFN-γ表达含量。 3.培元定喘汤能明显下调小鼠PI3K、AKT mRNA表达水平而提高Th1型细胞因子，降低Th2型细胞因子的表达，改善肺部炎症反应。
NETL