摘要
目的:探讨新疆桑白皮对主要致龋细菌在浮游及生物膜状态下生长、致龋毒力因子及生物膜形态结构活性的作用。 方法:1.新疆桑白皮对变异链球菌、血链球菌、黏性放线菌浮游状态生长及致龋毒力因子作用的研究:采用液体稀释法测定新疆桑白皮对上述3种主要致龋菌的最低抑菌浓度、最低杀菌浓度，并绘制生长曲线;根据生长抑制率公式筛选50％最低抑菌浓度，并用于后续实验研究;分别采用△pH法和蒽酮硫酸法测定新疆桑白皮对上述3种主要致龋菌浮游状态下产酸和产胞外多糖能力的作用;采用玻壁法测定对黏附能力的作用;2.新疆桑白皮对上述3种主要致龋菌单菌种生物膜形成、生物膜状态致龋毒力因子及生物膜形态结构活性作用的研究:通过结晶紫染色法测定新疆桑白皮对上述3种主要致龋细菌单菌种生物膜最低生物膜抑制浓度和最低已形成生物膜清除浓度;筛选50％最低生物膜抑制浓度和50％最低已形成生物膜清除浓度，并用于后续实验研究;采用△pH法测定新疆桑白皮对上述3种主要致龋菌生物膜状态产酸能力的作用，并通过不同时间节点测定pH值绘制pH曲线;采用蒽酮硫酸法测定新疆桑白皮对上述3种主要致龋菌生物膜状态产胞外多糖能力的作用;分别采用乳酸脱氢酶活性实验和钙离子泄漏实验，测定新疆桑白皮对致龋菌生物膜细菌的破坏作用;利用扫描电子显微镜观察致龋菌生物膜形态;通过生物膜活死菌染色实验利用激光共聚焦显微镜观察对生物膜细菌活性的作用。 结果:1.新疆桑白皮对变异链球菌、血链球菌、黏性放线菌的50％最低抑菌浓度分别为0.5、0.5、0.25 mg/mL,最低杀菌浓度分别为4.0、2.0、1.0 mg/mL;与阴性对照组相比，新疆桑白皮对3种主要致龋细菌在浮游状态下产酸、产多糖以及黏附能力均有良好的抑制作用(P＜0.05);2.新疆桑白皮对变异链球菌、血链球菌、黏性放线菌的50％最低生物膜抑制浓度分别为1.0、1.0、0.5 mg/mL,50％最低已形成生物膜清除浓度分别为4.0、4.0、2.0 mg/mL。新疆桑白皮药液对3种主要致龋细菌生物膜状态下产酸、产多糖能力的抑制作用较阴性对照组强(P＜0.05);乳酸脱氢酶活性实验和钙离子泄漏实验结果显示，新疆桑白皮对生物膜细菌的破坏作用呈浓度依赖性，在高浓度下破坏作用更为明显，差异与对照组有统计学意义(P＜0.05);扫描电镜观察结果显示随着新疆桑白皮药物浓度的增加，生物膜形成量与对照组相比逐渐减少;活死菌染色结果显示随着新疆桑白皮药物浓度的增加死细菌数量开始明显增高且活细菌/死细菌比例下降。 结论:新疆桑白皮能够抑制3种主要致龋细菌在浮游及生物膜状态下生长，产酸，产糖，黏附能力，同时也能抑制其生物膜的形成并破坏生物膜细菌，能够影响生物膜形态结构及活性。
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