摘要
目的： 通过观察针刺结合五行音乐对抽动障碍（Tic disorder，TD）大鼠行为学表现、脑纹状体内多巴胺（Dopamine，DA）系统及神经元变化情况，探究针刺结合五行音乐改善TD大鼠抽动表现与焦虑情绪的作用机制，为治疗TD提供理论支持。 方法： 将66只SPF级3周龄雄性大鼠称重、编号后，随机分成正常组、模型组、泰必利组、音乐组、针刺组、结合组6组，每组11只。其中正常组：在标准环境下常规饲养，对大鼠不进行干预;模型对照组：造模后不进行其他干预;药物组：予以盐酸泰必利混悬液灌胃;五行音乐组：音乐治疗选取徵调音乐进行播放，每次治疗45分钟;针刺组选取百会、肝俞、心俞、太冲、内关进行针刺治疗，每次治疗30分钟;结合组将针刺与五行音乐结合进行治疗;所有方法总计干预28d，治疗6d休息1d。在干预结束后，应用刻板行为评分评价抽动状态;旷场实验评估各组TD大鼠焦虑情绪;Nissl染色检测各组大鼠纹状体区神经元损伤状况;ELISA检测TD大鼠脑纹状体DA含量水平;Western blot技术检测TD大鼠纹状体组织中多巴胺D1受体（Dopamine Receptor D1，DRD1）和多巴胺D2受体（Dopamine Receptor D2，DRD2）蛋白的表达。 结果： 1.各组TD大鼠刻板行为评分 各组TD大鼠治疗后刻板行为评分由高到低依次为模型组＞音乐组＞针刺组＞结合组＞泰必利组。其中，模型组大鼠刻板行为评分显著高于正常组，具有统计学差异（P＜0.01）;治疗后泰必利组、针刺组、结合组大鼠评分显著低于模型组大鼠（P＜0.01），音乐组大鼠评分低于模型组大鼠（P＜0.05），具有统计学差异;结合组大鼠刻板行为评分显著低于音乐组（P＜0.01）及针刺组（P＜0.05），具有统计学差异;与泰必利组相比，无统计学差异（P＞0.05）。 2.各组TD大鼠旷场实验检测结果比较 在五分钟的活动时间内，模型组TD大鼠进入中心区域活动时间和距离百分比显著低于正常组大鼠，治疗后各组TD大鼠活动时间和距离百分比均呈现不同程度的增高。 （1）进入中心区域活动距离百分比：模型组大鼠活动距离百分比显著低于正常组，具有统计学差异（P＜0.01）;治疗后泰必利组、针刺组、结合组大鼠活动百分比显著高于模型组（P＜0.01），音乐组大鼠活动百分比高于模型组（P＜0.05），具有统计学差异;结合组大鼠活动距离百分比高于针刺组、泰必利组（P＜0.05）及音乐组（P＜0.01），具有统计学差异。 （2）进入中心区域活动时间百分比：模型组大鼠活动时间百分比显著低于正常组，具有统计学差异（P＜0.01）;泰必利组、音乐组、针刺组、结合组大鼠活动时间百分比均显著高于模型组，具有统计学差异（P＜0.01）;其中，结合组大鼠活动时间百分比高于音乐组、针刺组和泰必利组，具有统计学差异（P＜0.05）。 3.各组TD大鼠纹状体区神经元损伤状况 与正常组相比，模型组大鼠纹状体区神经元排列紊乱且稀疏，分布不均，细胞间隙增大，胞体变小，尼氏体和神经元数目显著下降，提示TD会导致纹状体区神经元损伤。干预过后，各治疗组大鼠神经元损伤状况均有所改善，其中五行音乐组、针刺组大鼠纹状体区神经元尼氏体数量逐渐增多，细胞间隙减小，排列变得有序。而泰必利组大鼠区神经元分布紧密均匀，结构完备，尼氏体丰富，与正常组最为接近。结合治疗组大鼠与泰必利组相似，表现为大部分神经元细胞结构完备，细胞排列稍紊乱，细胞间隙减小。 4.各组TD大鼠纹状体中DA含量比较 治疗后各组TD大鼠纹状体内DA含量均呈现不同程度的降低。DA含量比较结果为：模型组＞音乐组＞针刺组＞泰必利组＞结合组。其中，模型组TD大鼠纹状体内DA含量显著高于正常组，具有统计学差异（P＜0.01）;治疗后泰必利组、针刺组、结合组大鼠DA含量显著低于模型组大鼠（P＜0.01），音乐组大鼠DA含量低于模型组大鼠（P＜0.05），具有统计学差异;结合组大鼠DA含量显著低于音乐组（P＜0.01）及针刺组（P＜0.05）,具有统计学差异，与泰必利组大鼠相比无统计学差异（P＞0.05）。 5.各组TD大鼠纹状体组织中DRD1、DRD2蛋白的相对表达量 各组TD大鼠纹状体DRD1的蛋白表达检测结果从高到低为：正常组＞泰必利组＞结合组＞针刺组＞五行音乐组＞模型组。其中，模型组大鼠DRD1蛋白表达显著低于正常组，具有统计学差异（P＜0.01）;泰必利、针刺、五行音乐、结合组大鼠DRD1蛋白表达高于模型组（P＜0.05）,具有统计学差异;结合组大鼠蛋白表达显著高于音乐组（P＜0.01）及针刺组（P＜0.05），具有统计学差异，与泰必利组相比无统计学差异（P＞0.05）。 DRD2的蛋白表达检测结果与DRD1相反，其蛋白表达检测结果从高到低为模型组＞音乐组＞针刺组＞结合组＞泰必利组＞正常组。模型组大鼠蛋白表达显著高于正常组，具有统计学差异（P＜0.01）;泰必利组、针刺组、音乐组、结合组大鼠蛋白表达低于模型组，具有显著统计学差异（P＜0.01）;结合组大鼠蛋白表达低于音乐组、针刺组有统计学差异（P＜0.05），与泰必利组相比无统计学差异（P＞0.05）。 结论： 1.针刺、五行音乐治疗均可以显著降低TD大鼠抽动刻板行为评分，减少抽动外在症状表现，增加大鼠在旷场中心区域活动时间与路程，缓解焦虑情绪，二者结合优于单一治疗。 2.针刺、五行音乐治疗均可以改善TD大鼠纹状体区神经元损伤状况，上调DRD1蛋白表达，下调DRD2蛋白表达，降低纹状体中DA含量，二者结合优于单一治疗。 3.针刺结合五行音乐治疗可以改善TD的抽动症状及缓解焦虑情绪，其机制可能与纹状体区DRD1表达上调、DRD2表达下调，进而影响DA系统有关。
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