摘要
由草鱼呼肠孤病毒（Grass Carp Reovirus, GCRV）引起的草鱼出血病导致了水产养殖业的损失大量经济资源，疫苗已被广泛认为是一种有效预防疾病的手段。口服干酪乳杆菌进行免疫具有良好的安全性和高效性，口服的免疫方式体现出了其易于给药、免注射等优势，是一种非常具有潜力的免疫途径。在本研究中，以GCRV的外衣壳蛋白VP5作为免疫原，基于乳酸杆菌分泌表达载体pVE5523，构建了重组干酪乳杆菌LC-pVE5523-VP5。通过真空冷冻干燥技术将菌液制备成冻干菌粉，再将冻干菌粉与饲料进行混合压制、制备成颗粒饲料。在口服干酪乳杆菌菌粉饲料免疫期间，LC- pVE5523-VP5 能显著上调草鱼免疫相关基因（IFN I、IgM）的表达。随着口服免疫天数的增加，血清中IgM水平也有所上升。面对GCRV 的感染，口服 LC- pVE5523-VP5 疫苗组的草鱼存活率为 74 %，明显高于对照组35 %。通过荧光定量检测病毒的复制量，结果显示 LC- pVE5523-VP5 组病毒在组织中的含量明显少于未免疫组。停止口服疫苗后15天，依然能在草鱼肠道检测到 LC- pVE5523-VP5 菌体的存在。这些结果表明，本研究开发了一种能够有效预防GCRV感染的口服干酪乳杆菌疫苗LC-pVE5523-VP5，具有易于制备，低成本，效果良好等特点。同时也为鱼用口服疫苗的相关研究提供了一定的参考价值。
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