摘要
红枣是鼠李科枣属(Ziziphus Jujube Mill.)植物枣树的成熟果实,富含多种生物活性成分,具有益气补血、免疫调节和抗疲劳等功效,为避免活性物质的未充分利用和单一提取造成的资源浪费,因此,本试验建立分级制备红枣中总黄酮、总生物碱和多糖的一体化提取工艺,并探究红枣中总黄酮、总生物碱和多糖的益气补血作用,最后通过模糊数学法与正交试验法优化红枣多糖压片糖果的最佳配方,并进行质量评价,本研究为新疆红枣资源的进一步开发利用提供理论参考。主要结果如下: (1)分级制备红枣总黄酮、总生物碱和多糖的一体化提取工艺:以红枣为原料,确定碱提酸沉法提取红枣总黄酮最佳工艺为碱提pH 10.5、乙醇浓度62%、料液比1∶21 g/mL、酸沉pH 3.2,此时,所制备的红枣总黄酮成品为棕黄色粉末,得率为1.12%,总黄酮含量为25.37%;以上一步提取残渣为原料,确定酸提碱沉法提取红枣总生物碱提取工艺为乙醇浓度80%、料液比1∶22 g/mL、提取温度73℃、溶剂pH 2.1,此时,所得红枣总生物碱成品为浅黄色粉末,得率为2.62%,经生物碱沉淀剂鉴别,观察试验现象,确定存在生物碱类物质;以第二步所得残渣为原料,确定水提醇沉法提取红枣多糖最佳工艺为料液比1∶18 g/mL、提取温度为93℃、提取时间80 min,此时,所得红枣多糖成品为褐色粉末,得率为6.11%,多糖含量为53.48%。 (2)红枣总黄酮、总生物碱和多糖对气血双虚小鼠的调节作用:建立气血双虚模型小鼠,以脾脏、肝脏和肾脏指数与病理形态、疲劳相关生化指标、造血功能和炎症相关因子评价红枣枣粉、红枣浸膏、红枣总黄酮、红枣总生物碱和红枣多糖对气血双虚模型小鼠的调节作用。试验显示,气血双虚模型小鼠体征上出现毛发无光泽、容易脱落、食欲不振和精神萎靡等现象,脾脏、肝脏和肾脏指数显著降低,病理切片显示各组织有炎性细胞浸润,负重游泳时间显著降低,血清中与疲劳相关生化指标乳酸(Lactic Acid,LA)、尿素氮(Blood Urea Nitrogen,BUN)和丙二醛(Malondialdehyde, MDA)累积增多,肝糖原(Hepatic glycogen,LG)降低,抗氧化酶过氧化氢酶(Catalase,CAT)、超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(Glutathione peroxidase,GSH-Px)活性均显著降低,与造血功能相关指标血常规水平和造血相关因子促红细胞生成素(Erythropoietin, EPO)、粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(Granulocyte-macrophage Colony Stimulating Factor,GM-CSF)和白介素-3(Interleukin-3,IL-3)含量均显著降低,同时,与炎症相关因子白介素-2(Interleukin-2, IL-2)、肿瘤坏死因子-α(Tumour necrosis factor-α,TNF-α)、白介素-1β(Interleukin-1β,IL-1β)和白介素-18(Interleukin-18,IL-18)含量均显著降低,而红枣枣粉、红枣浸膏、红枣总黄酮、红枣总生物碱和红枣多糖能够提高气血双虚小鼠各脏器指数,减轻病理损伤,延长负重游泳时间,降低血清中代谢产物LA、BUN和MDA含量,提高LG合成,缓解疲劳,增强CAT、SOD和GSH-Px活性,减轻氧化应激损伤,改善血常规水平和造血相关因子EPO、GM-CSF和IL-3含量,恢复机体的造血功能,同时还能增加炎症相关因子IL-2、TNF-α、IL-1β和IL-18含量,促进炎症因子的表达,其中红枣多糖对气血双虚小鼠的调节作用最佳。 (3)红枣多糖压片的制备及其质量评价:通过模糊数学法与正交试验相结合优化出的红枣多糖压片糖果最佳配方为:红枣多糖添加量40%,微晶纤维素添加量20%、木糖醇添加量13%、树莓粉添加量7%,此时,制备的红枣多糖压片糖果颜色美观,酸甜协调,色泽均匀,口感清凉,有树莓淡香气味,感官评分达8.50分,其质量评价指标中片重差异、脆碎度、崩解时限和硬度的测定均符合相关的规定。