摘要
目的： 1、实验研究：建立卵清蛋白（OVA）致敏哮喘大鼠模型，用射干麻黄汤（SMD）治疗，基于多组学技术探讨SMD的抗哮喘机制。 2、临床研究：客观评价SMD治疗小儿寒性哮喘的临床疗效，为SMD的临床应用提供科学依据。 方法： 1、实验研究：72只大鼠随机分为6组，即对照组（Control组）、模型组（Model组）、SMD高、中、低剂量组（SMD-H、SMD-M、SMD-L组）、醋酸地塞米松片组（Dex组），每组12只，除Control组外，其余各组均建立OVA致敏哮喘大鼠模型。SMD-H、SMD-M、SMD-L组分别给予不同剂量的SMD，Dex组给予醋酸地塞米松片， Control、Model组给予相应的蒸馏水。采用酶联免疫法（ELISA）检测各组大鼠血清免疫球蛋白E（IgE）、白细胞介素-4（IL-4）、白细胞介素-6（IL-6）、C-反应蛋白（CRP）水平。对各组大鼠肺组织进行苏木素-伊红染色（Hamp;E）观察其病理形态学变化，并进行气道炎症评分。基于代谢组学（LC-MS）和蛋白质组学（TMT）技术筛选大鼠肺组织中的生物标志物和差异表达蛋白（DEPs），利用多组学综合分析方法探讨SMD治疗哮喘的信号转导途径。通过蛋白质免疫印迹实验（WB）检测各组大鼠肺组织中MyD88、IKK（α）、P-NF-κB（p65）、NF-κB（p65）、P-IκBα及IκBα蛋白表达水平。 2、临床研究：选取寒性哮喘患儿66例，随机分为对照组和试验组，每组33例。对照组给予吸入用布地奈德混悬液雾化吸入治疗；试验组在此基础上给予SMD口服治疗。分别比较两组治疗前和治疗后的中医证候积分、呼出气一氧化氮（FeNO）浓度、肺功能检测指标[呼气峰流速百分比（PEF%）、第1秒用力呼气容积百分比（FEV1%）、用力肺活量（FVC）、1秒率（FEV1/FVC）]以及两组的临床总有效率。 结果： 1、实验研究：与Control组相比，Model组大鼠血清IgE、CRP、IL-4和IL-6水平显著增加（P＜0.05）；经SMD治疗后，大鼠血清IgE、CRP、IL-4和IL-6水平显著降低（P＜0.05）。与Control组比较，Model组大鼠支气管管腔变窄，炎症细胞严重浸润周围支气管、血管和结缔组织中，气道炎症损伤评分显著升高；经SMD治疗后，大鼠支气管周围炎症细胞浸润程度明显减轻，病理损伤减轻，气道炎症损伤评分呈剂量依赖性降低。从大鼠肺组织中共筛选出34种生物标志物和84种DEPs，主要参与了脂质代谢、吞噬/溶酶体途径、烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（NADPH）氧化酶及其产物活性氧（ROS）介导的氧化应激。与Control组比较，Model组大鼠肺组织中MyD88、IKK（α）、P-NF-κB（p65）、NF-κB（p65）、P-IκBα及IκBα蛋白表达水平升高（P＜0.05）；经SMD治疗后，大鼠肺组织中MyD88、IKK（α）、P-NF-κB（p65）、NF-κB（p65）、P-IκBα及IκBα蛋白表达水平降低（P＜0.05）。 2、临床研究：治疗后，两组患儿的中医证候积分均有不同程度的降低；试验组的中医证候积分明显低于对照组（P＜0.05）。治疗后，两组患儿FeNO浓度均有不同程度的降低；试验组的FeNO浓度低于对照组（P＜0.05）。治疗后，两组患儿肺功能均有不同程度的改善；试验组患儿的PEF%、FEV1%、FVC及FEV1/FVC均高于对照组（P＜0.05）。试验组临床总有效率显著高于对照组（P＜0.05）。 结论： 1、实验研究：SMD能够通过调控MyD88/IKK/NF-κB信号通路，减轻气道炎症反应，改善气道重塑，进而达到治疗哮喘的目的。 2、临床研究：采用SMD治疗小儿寒性哮喘可缓解患儿的临床症状，改善肺功能，减轻气道炎症水平，提高临床总有效率。
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