摘要
目的：探讨循环死亡（Donation after Cardiac Death，DCD）大鼠离体肺体外灌注（Ex Vivo Lung Perfusion）期间自噬产生的作用及通过影响自噬实现对肺组织EVLP期间的保护作用。 方法：将一月龄雄性 SD大鼠随机分成常规体外灌注组（EVLP）与4℃冷保存组，每组各6只。建立大鼠DCD模型及供肺EVLP模型。比较两组的湿重/干重（W/D）比值，供肺形态学水平及细胞凋亡水平。再将EVLP组分为常规EVLP组及改良灌注液组，分别在灌注液中加入3-MA（自噬抑制剂）和雷帕霉素（自噬激活剂），每组各6只。比较三组的自噬相关抗体水平，W/D比值，肺组织形态学，肺功能水平，细胞凋亡水平。 结果：冷保存组与常规EVLP组相比，冷保存组顺应性更差，W/D比值更高（P＜0.05）且肺泡结构破坏更严重。冷保存组的细胞凋亡水平更高。而比较常规EVLP与改良EVLP组后发现，雷帕霉素组的肺动脉压力最高，3-MA组与常规EVLP组相似（P＜0.05）。比较三组的动静脉氧分压差与吸入氧浓度比例后发现，3-MA组的动静脉氧分压差与吸入氧浓度比例最高，而雷帕霉素组的比例最低（P＜0.05）。比三组EVLP期间的气道压力后发现，三组气道压力无明显差异（P＞0.05），差异无统计学意义。3-MA组供肺组织形态学较雷帕霉素组更好。灌注结束后，通过Western Blot及免疫荧光显示3-MA组自噬相关抗体水平下调，雷帕霉素组自噬水平上调，三组中雷帕霉素组的细胞凋亡水平最高，而3-MA组细胞凋亡水平最低。 结论：EVLP作为一种供肺体外灌注保存平台，相较于冷保存可以更好地保存供肺，降低细胞凋亡水平。同时，通过进一步抑制自噬，可以实现进一步有效减轻肺缺血再灌注损伤，而增强自噬，则会加重肺缺血再灌注损伤。
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