摘要
目的:基于肠道菌群探讨加味黄芪桂枝五物汤干预动脉粥样硬化（atherosclerosis,AS）的作用及其可能机制，为中医药防治AS及调节肠道微生态提供科学的理论依据。 方法:选取64只有C57BL/6J遗传背景的健康雄性8周龄ApoE-/-小鼠，随机分为正常对照组（N组）12只，予以基础喂养;其余52只作为造模组（M组），予以高脂喂养。持续喂养12周后，两组各取4只小鼠行主动脉大体油红O染色，鉴定是否造模成功。造模成功后，将M组剩余50只小鼠随机分为5组:阴性对照组（NC组）、阳性药物组（PD组）、加味黄芪桂枝五物汤低剂量组（HQ-L组）、加味黄芪桂枝五物汤中剂量组（HQ-M组）、加味黄芪桂枝五物汤高剂量组（HQ-H组），每组10只。在原喂养方案基础上，N组与NC组予以生理盐水0.1ml/10g灌胃;PD组小鼠给予阿托伐他汀钙溶液灌胃溶液1.5 mg·kg-1·d-1,HQ-L 组按照 7.5 g·kg-1·d-1 给药，HQ-M组按照 15 g·kg-1·d-1 给药，HQ-H组按照30 g·kg-1·d-1给药。干预4周程后，检测各组小鼠血清TC、TG、LDL-C、HDL-C,观察各组小鼠血脂水平差异;行小鼠主动脉根部HE染色，观察其病理变化;行小鼠主动脉大体油红O染色，比较其血管内膜AS斑块面积百分比;提取粪便DNA行16SrDNA检测，观察各组小鼠肠道菌群结构及丰度变化。 结果: 1、血脂检测结果:与N组比较，NC组TC、TG、LDL-C水平均上调，HDL-C水平下调;与NC组比较，PD组、HQ-L组、HQ-M组、HQ-H组TC、TG、LDL-C水平均下调，HDL-C水平均上调。HQ-H组与P D组相比，TC、LDL-C差异有统计学意义（P＜0.05）,TG、HDL-C差异均无统计学意义（P＞0.05）;与HQ-L组相比，TC、HDL-C差异有统计学意义（P＜0.05）;与HQ-M组相比，TG、LDL-C差异有统计学意义（P＜0.05）。 2、主动脉大体油红O染色:与N组相比，NC组主动脉内膜斑块面积百分比显著升高（P＜0.05）;PD组和HQ-L、HQ-M、HQ-H组主动脉斑块面积百分比与NC组相比分别减少了 61.16％,23.08％,32.76％,57.97％（P值均＜0.05）,其中HQ-H组与PD组相比，差异无统计学意义（P＞0.05）。 3、主动脉根部HE染色:HE染色结果表明，相较于N组，NC组小鼠的AS病理改变程度最为严重，包含大量胆固醇结晶及钙化现象，存在显著的血管内膜增厚现象，伴随着大量的泡沫细胞和炎性细胞的密集浸润;与NC组比较，PD、HQ-L、HQ-M、HQ-H组小鼠AS病变程度均明显减轻，其中，PD组AS病变程度减轻最明显，AS斑块沉积最少,血管内膜仅轻度增厚，泡沫细胞数量最少，HQ-H组次之。 4、肠道菌群检测:在门、科、属、种水平上，各组间均有明显差异。在门水平，B/F比值在各组间差异主要表现为:N组＞HQ-H组＞HQ-M组＞HQ-L组＞PD 组＞NC组。N组B/F比值最高，HQ-H组次之，NC组最低。 结论:①加味黄芪桂枝五物汤能有效调节AS小鼠的血脂水平，发挥抗AS作用，同时能调节小鼠肠道菌群的丰度及结构，且高剂量组优于中、低剂量组;②肠道菌群可能是加味黄芪桂枝五物汤改善AS的潜在机制之一。
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