摘要
准噶尔山楂（ Crataegus songarica ），隶属于蔷薇科（ Rosaceae ）山楂属（Crataegus）小乔木种子植物。三萜类化合物是准噶尔山楂的活性成分之一，目前对准噶尔山楂中三萜类化合物的研究主要集中于三萜酸，而对于总三萜未见报道。因此本文以准噶尔山楂为原料，通过响应面法优化其果实和果核中总三萜提取方法；通过D101型大孔树脂纯化总三萜提取物，并优化纯化条件；通过采用液相色谱-质谱联用技术对准噶尔山楂各萃取物的化学成分进行分析。主要结论如下： （1）优化显色条件以及准噶尔山楂果实及果核总三萜的提取条件。结果显示香草醛-冰乙酸-高氯酸比色法测定准噶尔山楂中总三萜提取量的优化条件为：5%香草醛-冰乙酸用量为0.4 mL，高氯酸用量为1.0 mL，在60℃的水浴温度条件下反应15 min，移至冰浴静置5 min，在550 nm的波长条件下测定。酶辅助提取准噶尔山楂果实总三萜的最优提取条件为：以1?24 g/mL的料液比，在51℃的酶解温度条件下提取76 min，此条件下果实总三萜的平均提取量为（36.57±0.33） mg/g。酶辅助提取准噶尔山楂果核中总三萜提取量的最优提取条件为：以1?21 g/mL的料液比，在酶解温度为46℃的条件下酶解58 min。通过3次平行实验验证，得到在此条件下果核总三萜平均提取量为（4.68±0.13）mg/g。在提取次数为两次的条件下，比较两次均用酶辅助提取法与酶-超声分步提取法的准噶尔山楂总三萜提取量，发现后者总三萜提取量高于前者，因此为了提高提取效率，采用酶-超声分步提取准噶尔山楂果实总三萜，并通过响应面法优化第二步超声辅助提取条件，结果显示以1?14 g/mL的料液比加入70%的乙醇溶液，在45℃，120 W的超声条件下提取33 min，在此条件下分步提取果实总三萜的总平均提取量为（53.78±1.12） mg/g，RSD为2.09%。 （2）优化大孔树脂纯化准噶尔山楂总三萜提取物的方法：比较AB-8、D101和X-5型大孔树脂对准噶尔山楂总三萜的吸附与解吸能力，筛选出最优大孔树脂，并优化其上样条件和洗脱条件。综合考虑吸附与解吸能力，选择D101型大孔树脂纯化准噶尔山楂果实提取物，并优化其纯化条件，结果显示以6 mg/mL的浓度上样，上样液体积为15 mL，以70%的乙醇溶液进行洗脱，洗脱液体积为50 mL，在此条件下纯化准噶尔山楂粗提物后纯化物中总三萜纯度提高至29.93%。 （3）准噶尔山楂不同萃取物化学成分：依次用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇萃取准噶尔山楂提取物，采用超高效液相串联四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱系统（UPLC-Q Exactive MS/MS）检测各相化学成分，共检测出25个化合物，主要包括9种黄酮、5种三萜、7种酚酸及其他化合物，其中酚酸包括咖啡酸、绿原酸等，三萜主要以三萜酸为主，黄酮主要包括芦丁和金丝桃苷等。
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