摘要
背景： 中性粒细胞胞外陷阱（NET）是中性粒细胞产生的网状结构，通常由从细胞核或线粒体释放的DNA和各种蛋白质组成。越来越多的证据表明，NET与免疫、糖尿病和肿瘤等多种疾病的发生、发展有关。包括直肠腺癌在内的多种实体瘤中都能够检测到NET,然而，NET与胃癌和直肠癌，尤其是局部进展期直肠癌（LARC）和进展期胃癌的预后和新辅助治疗反应之间的内在联系及其影响机制仍未确定。 方法： 1.在直接手术组中招募了240名未接受新辅助治疗而直接手术的LARC患者，以及153名接受术前新辅助治疗并进行活检的LARC患者，两组患者均设立训练组和验证组。 2.胃癌患者的公共数据收集自NCBI基因表达综合（GEO）数据库中的亚洲癌症研究组队列（ACRG）,同时收集接受PD-1治疗的进展期胃癌患者临床信息。 3.将入组患者的临床标本行福尔马林固定，石蜡包埋切片后进行免疫组化、免疫荧光染色和生物信息学分析。通过髓过氧化物酶（MPO）和瓜氨酸组蛋白H3（CitH3）免疫荧光染色识别NET。 结果： 1.对于LARC患者，在直接手术组的训练集和验证集中，NET与无复发生存率相关。其中高NET密度（High-NET）预示术后生存率较低。单因素和多因素回归分析发现，NET、TNM分期和中性粒细胞与淋巴细胞比率（NLR）是无复发生存率的独立预后因素。低NET密度（Low-NET）的LARC患者CD8+T细胞增加，调节性T细胞（Treg）浸润降低，这表明NET密度低的肿瘤免疫微环境具有很强的抗肿瘤能力。高NET密度与上皮-间质转化有关，而上皮-间质转化被认为有助于肿瘤进展。在新辅助治疗队列中，活检中的高NET密度与完全/接近完全缓解的可能性降低显著相关。 2.对于胃癌患者，NET可被聚类分析归为NT1和NT2两类，与NT2相比，NT1胃癌具有更高密度NET,同时预后也更差。免疫浸润分析显示NT2具有更强的抗肿瘤免疫和更低的肿瘤纯度。在免疫治疗队列中，活检中的高NET密度与PD-1治疗有效的可能性降低密切相关。 结论： 在LARC和胃癌中，NET密度是一个独立的预后因素，与患者的生存相关,而治疗前活检中的NET密度是新辅助治疗和免疫治疗反应的独立预测生物标志物。利用这一生物标志物可能有助于更准确地预测局部晚期直肠癌和胃癌患者的生存率，并筛选出对新辅助治疗与免疫治疗有反应的患者。
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