摘要
防风Saposhnikoviadivaricata(Turcz.)Schischk.是我国传统的大宗中药材之一，具有祛风解表、胜湿止痛、止痉之效。目前2020版《中国药典》中以升麻素苷和5-O-甲基维斯阿米醇苷两种成分作为评价指标，但仅以这两种成分评价防风药材质量，不足以反映防风药材的整体特征。本课题以17批不同产地的防风为研究对象，建立了防风10种化学成分同时定量分析的测定方法和体外抗炎、抗氧化模型，将化学成分与体外活性相关联，确定其发挥抗炎抗氧化作用的关键药效成分，并对关键药效成分与土壤因子的相关关系进行研究，为防风药材的质量控制和优质资源开发利用提供理论依据。主要研究结果如下： 1.17批不同产地防风样品中水分、灰分、醇溶性浸出物含量均符合2020版《中国药典》规定。通过响应面实验分析确定防风总多糖的最佳微波提取条件为料液比1∶28.67g·mL-1，提取时间10.94min，功率657.28W，不同产地防风样品总多糖含量在1.71%~8.33%之间，其中S10产自吉林白城永茂林场的2年生防风样品总多糖含量最高，S2产自内蒙赤峰柳条沟的1年生防风样品总多糖含量最低。不同产地防风样品中10种化学成分总含量在3.41mg·g-1~13.06mg·g-1之间，以S5产自内蒙赤峰林西的2年生防风样品10种化学成分总含量最高，S13产自河北承德胡麻营的1年生防风样品10种化学成分总含量最低。防风中10种化学成分含量差异较大，含量较高的为5-O-甲基维斯阿米醇苷，含量较低为亥茅酚。聚类分析结果表明17批防风样品一共聚为4类，呈现一定的区域性特征。主成分分析结果表明产自内蒙古、吉林地区的2年生防风样品综合得分较高，综合质量较优。 2.不同产地防风提取物以200μg·mL-1浓度处理时，可以不同程度的降低脂多糖（LPS）诱导的小鼠巨噬细胞RAW264.7模型中一氧化氮（NO）、白细胞介素-6（IL-6）、白细胞介素-1β（IL-1β）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的表达水平。其中S9~S11产自吉林白城的2年生防风对以上4种炎症因子均具有较强的抑制作用，抗炎效果较好。根据相关性分析、灰色关联度分析和偏最小二乘分析的综合结果，推测升麻素苷、5-O-甲基维斯阿米醇苷、升麻素、亥茅酚苷和5-O-甲基维斯阿米醇5种成分是防风发挥抗炎作用的关键物质基础。 3.通过1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（DPPH）和2,2-联氮-二（3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸）二铵盐（ABTS）自由基清除法分析防风提取物的抗氧化能力，发现不同产地的防风样品对两种自由基的半数清除浓度（IC50）分别在35.35μg·mL-1~59.53μg·mL-1、26.74μg·mL-1~50.54μg·mL-1范围内，其中产自内蒙和吉林地区的防风样品抗氧化能力较强，且不同产地2年生防风样品抗氧化能力普遍高于1年生防风样品。根据相关性分析、灰色关联度分析和偏最小二乘分析的综合结果，推测升麻素苷、5-O-甲基维斯阿米醇苷、升麻素、亥茅酚苷和5-O-甲基维斯阿米醇5种成分是防风发挥抗氧化作用的关键物质基础。 4.防风药材质量与土壤因子的多重线性回归分析结果表明影响防风5种药效成分总含量的主导因子为有效磷和有机质，且药效成分总含量随土壤中有机质含量的增加而增加，随有效磷含量的增加而减少；影响防风中总多糖含量的主导因子为有效磷，总多糖的含量随土壤中有效磷含量的增加而减少。
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