摘要
粗毛纤孔菌Inonotushispidus（Bull.:Fr.）P.Karst.是锈革孔菌科（Hymenochaetaceae）、纤孔菌属（Inonotus）的一种珍贵食药用菌，是传统中药桑黄的正源。为促进粗毛纤孔菌作为药品、保健品、食品等新兴产品市场化及桑黄产业化发展，本文在查阅大量文献基础上，利用山东黄河故道古桑树上生长的野生桑黄菌种在夏津桑黄基地开展了对粗毛纤孔菌规范化栽培规程及含有不同生长期粗毛纤孔菌子实体质量标准研究。 文献综述部分：分别对粗毛纤孔菌的研究进展及食药用菌的栽培及质量标准研究进展进行了综述。 实验研究部分：（1）生物学特性研究：比较了不同生长期桑树粗毛纤孔菌子实体的生物学特性。从性状鉴定、显微鉴定、理化鉴定（薄层色谱法、酯酶同工酶鉴定）三个方面对不同生长期粗毛纤孔菌生物学特性进行对比研究。研究表明，幼蕾期、成熟期和老化期粗毛纤孔菌子实体性状特征和显微特征存在显著差异。性状上，幼蕾期较成熟期和老化期个体较小，成熟期主要特征为边缘和非孔口面被黄褐色毛绒，老化期子实体变黑，革质至木栓质；显微上，幼蕾期可见黄褐色弯曲状充满内容物的菌丝，成熟期与老化期都是菌肉层菌丝颜色最深，且老化期存在弯曲的绳索状菌丝。以Hispidin标准品对照，三个不同生长期粗毛纤孔菌子实体样品溶液在相应位置可见相同荧光斑点，且幼蕾期和成熟期荧光斑点较老化期明显。不同发育时期的粗毛纤孔菌酯酶同工酶酶谱在质（酶带数目和迁移率）和量（酶带的强弱）上存在差异，菌丝体阶段，酯酶酶活性较弱，无显著条带，且老化期酶带数最多，具有5条酶带。为粗毛纤孔菌规范化栽培及质量标准研究提供了依据。 （2）规范化栽培规程研究：从粗毛纤孔菌生物学特性、菌种选择与季节安排、栽培设施、菌种培养基及栽培料配方等10个方面对桑树粗毛纤孔菌进行了从源头菌种到子实体整个过程的规范化栽培，并制定了规范化栽培规程草案。 （3）不同生长期桑树粗毛纤孔菌子实体检查和浸出物及含量测定研究：参照2020年版《中国药典》四部通则对不同生长期粗毛纤孔菌进行检查和浸出物项研究，并参考相关文献对不同生长期粗毛纤孔菌中原儿茶酸进行含量测定。结果显示，幼蕾期水分平均含量为10.17%、总灰分8.97%、酸不溶灰分0.91%；成熟期水分平均含量为12.01%、总灰分9.14%、酸不溶灰分2.06%；老化期水分平均含量为8.12%、总灰分11.89%、酸不溶灰分2.5%。考察了不同处理方式和乙醇浓度对粗毛纤孔菌浸出物含量的影响，发现热浸法和30%乙醇处理所得浸出物含量最高。幼蕾期粗毛纤孔菌水溶性浸出物及醇溶性浸出物平均含量分别为18.09%、12.16%；成熟期分别为19.78%、19.76%；老化期分别为21.54%、16.06%。幼蕾期原儿茶酸平均含量为18.69μg/g，成熟期为35.31μg/g，老化期为20.75μg/g。自幼蕾期至老化期，原儿茶酸含量先升高后降低，成熟期含量最高，幼蕾期含量最低。 （4）桑树与其他树种上不同生长期粗毛纤孔菌子实体指纹图谱对比研究：采用HPLC法建立寄生于桑树上的不同生长期粗毛纤孔菌指纹图谱，并与其它树种上生长的粗毛纤孔菌进行对比，建立了HPLC法测定粗毛纤孔菌中Hispidin分析方法。结果表明：该方法建立的HPLC指纹图谱可鉴别不同生长期桑树粗毛纤孔菌及其他树种粗毛纤孔菌。Hispidin均是各生长期桑树粗毛纤孔菌响应值最高的色谱峰，可将其作为各生长期桑树粗毛纤孔菌的参照峰。根据色谱峰保留时间及响应值，可初步判断：除Hispidin主要色谱峰外，三个不同生长期桑树粗毛纤孔菌存在5个共有色谱峰；此外，幼蕾期和老化期存在8个共有色谱峰。成熟期枫树、蒙古黄榆、水曲柳粗毛纤孔菌与成熟期桑树粗毛纤孔菌存在6个共有峰，老化期蒙古黄榆、水曲柳粗毛纤孔菌与老化期桑树粗毛纤孔菌存在6个共有峰。含量测定结果表明：随粗毛纤孔菌生长发育，Hispidin含量逐渐降低，幼蕾期平均含量最高，为189.324μg/g；老化期平均含量最低，为21.706μg/g；成熟期为65.248μg/g。
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