摘要
【背景】丙型肝炎病毒（hepatitisCvirus,HCV）感染是一种通过直接接触感染血液（输血）或通过受污染物质（不安全注射行为和医疗程序）间接感染的血液传播疾病，据世界卫生组织（worldHealthOrganization,WHO）最新估计，在全球范围内有1.3亿至1.85亿人感染HCV，而中国是世界上HCV感染人数最多的国家，在全球范围内实现世卫组织到2030年消除丙肝的规划仍面临巨大挑战。众所周知，病原体和宿主免疫反应之间的相互作用会影响宿主感染的结果。对抗HCV的第一道防线是先天免疫，自然杀伤细胞（naturalkillercells,NKC）作为先天免疫的重要成员，是宿主抗HCV免疫反应的重要参与者。属于免疫球蛋白超家族的杀伤细胞免疫球蛋白样受体（killer-cellimmunoglobulin-likereceptors,KIRs）是Ⅰ型跨膜糖蛋白，主要在NKC上表达。KIRs通过结合靶细胞表面相应的配体-人类白细胞抗原（humanleukocyteantigenclass,HLA）Ⅰ类分子，发挥抑制或激活NKC的作用。已经有研究发现KIR/HLA通路基因多态性与感染、自身免疫性疾病和癌症相关。作为KIR家族中的重要成员，KIR2DL4及其配体HLA-G被发现与慢性病毒感染和肿瘤等疾病有关联。综上我们提出KIR2DL4及其配体HLA-G基因的遗传变异会通过影响宿主免疫能力，进而影响HCV感染结局。 【目的】探讨KIR2DL4/HLA-G信号通路上上6个潜在功能单核苷酸多态性（singlenucleotidepolymorphism,SNPs）位点与HCV感染结局（易感性和慢性化）的关联及病因学机制。 【方法】本研究基于所处课题组构建的流行病学调查现场，选取了病例对照研究amp;病例-病例研究方法。研究对象的招募工作开始于2008年，期间连续招募既往有偿献血行为和吸毒行为的丙型肝炎病毒感染汉族高危人群，截止2018年共招募2253名研究对象。以中国汉族人群最小等位基因频率（minorallelefrequency,MAF）≥0.05为标准，r2≥0.8为以连锁不平衡相关系数的阈值进行筛选，对其代表的子集中的所有SNPs进行功能预测，最终选择KIR2DL4/HLA-G6个候选SNPs（rs660773、rs649216、rs660437、rs9380142、rs1707和rs1063320）。使用TaqMan探针实时荧光定量聚合酶链式反应（RT-PCR）技术对6个候选SNPs进行基因分型；采用采用四种遗传模型，包括显性模型（dominantmodel,DM）、隐形模型（recessivemodel,RM）、相加模型（additivemodel,AM）和共显性模型（co-dominantmodel,CDM）分析SNPs位点基因型频率分布与HCV感染易感性和感染慢性化的关联。位点联合作用采用Mantel-Haenszel卡方检验进行趋势性检验。 【结果】根据HCV抗体和HCVRNA检测情况分为三组包括1110例未感染对照组，439例自限清除组和704例持续感染组，其中自限清除组和持续感染组统称为HCV感染组，对未感染对照组和HCV感染组进行组间比较探索与HCV感染易感性的关联；对自限清除组和持续感染组进行组间比较探索与HCV感染慢性化的关联。研究发现，KIR2DL4-rs660773（A＞G，CDM：调整OR（modifiedOR,MOR）=1.234，95%CI=1.005～1.515，P=0.045；DM：MOR=1.222，95%CI=1.003～1.488，P=0.046）；HLA-G-rs9380142（A＞G，CDM：MOR=1.348，95%CI=1.105～1.643，P=0.003；DM：MOR=1.231，95%CI=1.020～1.486，P=0.031；RM：MOR=0.724，95%CI=0.538～0.975，P=0.034）与HCV感染易感性相关。未发现6个SNPs和HCV感染慢性化存在统计学关联（均P＞0.05）。单倍型分析显示，单体型Hap2（A-G）与HCV易感性存在统计学关联（MOR=1.45，95%CI=1.15-1.83，P=0.012）。联合作用分析显示，与携带rs660773-A和rs9380142-A等位基因的个体相比，携带1个危险（MOR=1.528，95%CI=1.237-1.889，P＜0.001）等位基因和携带2个危险等位基因（MOR=1.437，95%CI=1.126-1.834，P=0.004）的个体感染HCV的风险增加，rs660773和rs9380142危险等位基因的个数与危害效应间存在剂量反应关系，且随着危险等位基因个数的增加而增加（P=0.029）。危险等位基因型rs9380142和rs660773的个数与危害效应间存在剂量反应关系，且随着危险等位基因型个数的增加而增加（P＜0.001）。生物信息学分析后，结果显示rs660773和rs9380142可能通过影响对应KIR2DL4/HLA-G基因区域相关原件的活性或影响mRNA二级结构，上调或下调对应通路基因的表达，进而影响个体对HCV易感性。 【结论】本研究从中国高危人群角度，发现在KIR2DL4/HLA-G通路中rs9380142-G、rs660773-G等位基因和rs9380142-AG、rs660773-AG/GG基因型会增加HCV感染风险。为后续流行病学研究以及多种族人群的功能验证提供理论依据，并为在高危人群中更精准的防治HCV提供更多的思路。
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