摘要
益生菌具有调节宿主肠道微生态平衡、维持肠道健康、增强机体免疫力及抵御病原体感染等多种功能。本研究旨在从健康奶牛粪便中分离筛选出潜在益生菌，并对其益生特性和安全性进行分析。奶牛粪便采自内蒙古自治区乌兰察布市四子王旗和锡林郭勒盟镶黄旗奶牛散养户。形态学、分子生物学及生理生化试验用以鉴定细菌分离株；溶血、药敏、体外抑菌、耐酸、耐盐等试验用以评价其益生性能；小鼠体内试验中增重和采食量、拮抗沙门氏菌、多器官组织和粪便菌群变化等指标用以评价其安全性。主要结果如下： （1）菌株DY为表面粗糙褶皱、边缘不整齐的扁平乳白色菌落，菌株B为表面光滑、边缘整齐的圆形灰白色菌落；两者均为革兰氏阳性菌，菌株DY为长杆状，以单个、成对或链状形式排列，菌株B呈球形，以单个或成对形式排列。两者均可发酵利用葡萄糖、蔗糖、乳糖、蕈糖等大多数糖。16SrRNA基因测序鉴定菌株DY为地衣芽孢杆菌（Bacilluslicheniformis），菌株B为蒙氏肠球菌（Enterococcusmundtii）。蒙氏肠球菌B携带EC基因但不携带耐药基因vanA、tetM、tetK和ermB，且不携带毒力基因CylA、Esp、asal、EfaAfm、GelE、Agg和Ace。 （2）地衣芽孢杆菌DY和蒙氏肠球菌B均表现出抗生素敏感性、无溶血性、抑制沙门氏菌等病原微生物相关的益生特性，两者能耐受pH值为2-4和盐度为2-10%的环境条件，蒙氏肠球菌B在10%的盐度条件下活性最高。 （3）地衣芽孢杆菌DY与蒙氏肠球菌B单一及混合灌服小鼠均能增加体重，灌服蒙氏肠球菌B的料重比低于灌服地衣芽孢杆菌DY组和对照组。攻毒沙门氏菌组小鼠的组织器官发生病变；两株益生菌拮抗沙门氏菌组与攻毒组相比，能增加小肠绒毛长度、缓解小肠上皮细胞脱落及结肠组织局灶性糜烂。灌服益生菌能增加小鼠粪便中拟杆菌门、厚壁菌门、乳杆菌属的相对丰度。 综上，本研究分离鉴定的地衣芽孢杆菌DY和蒙氏肠球菌B具有益生性和安全性。该研究结果为单菌和混合菌制剂的研发应用提供了科学参考。
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