摘要
鳜鱼(Siniperca chuatsi)是中国传统的名贵淡水鱼类,随着鳜鱼驯化的兴起,鳜鱼转口困难成为需要解决的首要问题。本研究以鳜鱼稳定摄食量为目标,用不同浓度的诱食剂对鳜鱼进行诱食试验,以鳜鱼单次摄食量为指标,筛选出具有诱食效果的诱食剂,并确定其适宜的浓度用于鳜鱼驯化试验。试验评估了鳜鱼的生长性能、驯化率、肠道消化酶活性、鳜鱼食欲相关基因的表达情况、肠道结构及肠道菌群等指标,旨在探索诱食剂在鳜鱼驯化中的功能,并尝试筛选出对驯化期鳜鱼具有诱食和保健效果的诱食剂。 1、鳜鱼诱食剂的筛选及其对幼鳜鱼摄食的影响 将诱食剂按照其成分分为五组:A组(玉屏风多糖)、B组(发酵啤酒糟)、C组(黄粉虫)、D组(地龙)、E组(红虫),每组设定5个浓度梯度,每个浓度三个重复,以鳜鱼单次摄食量作为指标。结果显示,3%玉屏风多糖、15%发酵啤酒糟、10%黄粉虫、15%地龙和15%红虫均在诱食效果上表现较好(P<0.05)。将筛选出的诱食剂用于鳜鱼的驯化试验,试验分为6组:组A(无添加),组B(3% 玉屏风多糖),组C(15% 发酵啤酒糟),组D(10% 黄粉虫),组E(15% 地龙)和组F(15% 红虫组)。进行为期14 d的驯化养殖试验,驯化期间每日固定时间点饲喂两次,每次饲喂时间为1h。驯化养殖试验结束后,每组捞出60尾鱼空腹24 h后检测消化酶和相关生长指标,并以第15 d还未饲喂的时间点为0h,在各组正常投喂之后的1h和5h作为实验组,采集三个时间点的组织样品,用于检测诱食基因的表达量。 试验结果显示,B、C组诱食剂能显著提高鳜鱼特定生长率、肥满度和驯化率。B组显著提高淀粉酶活性,其他4个实验组的脂肪酶和淀粉酶均显著低于A组。诱食相关基因表达显示:0 h中D组的Npy、Agrp、Ghrelin、Pomc和Cart基因表达量均显著高于A组(P<0.05),F组Leptin基因的表达量高于A组(P<0.05);1 h的E组的Npy、Agrp和Leptin基因表达量高于A组(P<0.05), E、F组Pomc基因表达显著低于A组(P<0.05),F组Cart基因表达量高于A组(P<0.05),D组Ghrelin基因表达量显著高于A组(P<0.05);在5 h时, C、E、F组Npy基因表达量显著高于A组(P<0.05),C、D、F组Agrp基因表达量显著高于A组(P<0.05),D组Pomc基因表达量显著高于A组(P<0.05);E、F组Ghrelin基因表达量显著高于A组(P<0.05),C、E组Leptin基因表达量显著高于A组(P<0.05)。综合结果表明,B、C组诱食剂能提高鳜鱼生长性能,驯化率,及消化能力,但对鳜鱼的诱食作用没有D、E、F组强。 2. 不同诱食剂对鳜鱼肠道的影响 本试验延续上述驯化试验,试验分组一致,探究不同诱食剂对鳜鱼肠道结构与肠道菌群的影响。结果表明,B组绒毛膜高度最高,比A组绒毛膜长度高(P<0.05);E、F组隐窝深度低于A组(P<0.05);B、C、E肌层厚度比A组高(P<0.05),D、F组肌层厚度低于A组(P<0.05)。综上所述,3%玉屏风多糖和15%发酵啤酒糟能有效的改善鳜鱼的肠道结构;10%黄粉虫组、15%地龙组和15%红虫组阻碍了肠道结构的健康发育。 通过16S rDNA扩增子技术研究不同的诱食对鳜鱼肠道菌群的影响,由肠道菌群微生物多样性结果分析,可知F组的肠道菌群Alpha多样性高于对照组(P<0.05);与对照组相比,B、D、F组降低了变形菌群占比(P<0.05),提高了厚壁菌门的占比(P<0.05),D、E、F组则显著的提高了乳球菌属(P<0.05)。 综上结果:在幼鳜鱼驯化期间添加3%玉屏风多糖与15%发酵啤酒糟,可有效提高鳜鱼的生长性能和驯化率,提高鳜鱼消化酶活性,改善肠道结构,提高鳜鱼消化能力。