摘要
伊维菌素（Ivermectin，IVM）具有高效和毒副作用低的特点，被广泛应用于治疗和预防畜禽体内外寄生虫病。然而，由于 IVM的水溶性较差，口服给药时在动物机体内容易被破坏，使其生物利用度下降，从而限制了 IVM制剂在临床上的使用。因此，研发疗效好、稳定性高的 IVM的新剂型非常必要。本研究通过筛选环糊精载体，优化 IVM-环糊精包合物的制备方法，从而提高 IVM的水溶性和生物利用度，为IVM新剂型的研发提供依据。以下是主要研究内容： 1.IVM-环糊精包合物的制备：采用相溶解度实验方法筛选出羟丙基-γ-环糊精（hydroxypropy-γ-cyclodextrin，HP-γ-CD）作为包合反应的载体。实验结果表明，IVM与 HP-γ-CD的包合方式属于 Ap型。选用磁力搅拌法制备 IVM-HP-γ-CD包合物。通过单因素工艺优化和正交试验，研究不同的反应时间、反应温度和主客体摩尔比对包合作用的影响。通过正交实验数据的方差分析，确定最佳的包合条件为：包合时间为 6 h，包合温度为 55℃，主客体摩尔比为 5∶1。IVM-HP-γ-CD包合物水中的溶解度为 14.48 mg/mL，与 IVM原药相比，其溶解度增加了2895倍。体外溶出度的数据表明：IVM包合物的溶出速率与原药相比显著提高，且在 20 min内的累积溶出度超过 90%。 2.IVM-环糊精包合物的物相鉴定与稳定性考察：通过核磁共振波谱法、X射线衍射法、扫描电镜法对 IVM-环糊精包合物进行物相鉴定，证实了形成了包合物。核磁共振波谱法实验结果表明：IVM-HP-γ-CD 包合物图谱中存在 IVM的化学位移现象；X 射线衍射实验结果显示：IVM 呈现尖锐的衍射峰，但在相同的检测范围内， IVM-HP-γ-CD 包合物的尖锐峰消失；扫描电镜图像结果表明：IVM-HP-γ-CD包合物呈现出不规则的形态，这种结构与 IVM、HP-γ-CD及其物理混合物有所不同。以上实验结果均表明IVM与HP-γ-CD包合成功；通过对比高温、高湿和光照实验第 0天、第 5天和第 10天包合物和原药中 IVM有效含量的结果，可以得出结论，与原药相比，包合物在高湿度和强光条件下更稳定，但不耐高温。 3.犬体内的药动学研究：建立了血浆中 IVM 的高效液相色谱检测方法，流动相为乙腈：水=90∶10（v/v），检测波长为 254 nm，流速为 1 mL/min. ；进样量 20 μL ，柱温 35℃。将犬血浆用乙酸乙酯法萃取处理，高效液相色谱法进行检测，血浆中IVM在 0.025 μg/mL ~ 10 μg/mL 范围内，浓度与峰面积的线性方程为：Y=13.436X + 1.5212，相关系数 R2 = 0.9977，定量限为 0.025 μg/mL， 线性关系良好。IVM在血浆中的回收率在 93.58 ± 0.01%~ 110.40 ± 0.04%，日内差异系数在 0.83%~ 4.94%，日间差异系数在 4.35%~ 4.81%。结果表明，建立的犬血浆中 IVM的检测方法稳定性好、出峰时间稳定、回收率高、定量限能满足犬血浆中IVM含量的检测需求。 选用 10只体重在 3 ± 0. 5 kg 健康的中华田园犬，随机分为原药组和包合物组，给药前禁食。按照 IVM 有效含量为 3 mg/kg 的剂量进行口服给药。口服给药后分别在 0、1、2、4、8、12、24、36、48、60、72、84、96、120 h 静脉采血，血浆处理后高效液相检测。实验数据经 WinNonlin 5.2.1 软件分析处理，结果显示：IVM 的 t1/2 为 35. 82 ± 7.48 h，Tmax为 12.00 ± 6.93 h，Cmax为 1.25 ±0.13 μg/mL，AUC0-∞为 65.10 ± 28.54 μg·h/mL，AUC0-t 为 47. 90 ± 15.98 μg·h/mL，Vd为 2.54 ± 0.54 L/kg，Cl为 0.05 ± 0.02 L/kg/h。IVM包合物的 t1/2为46.11 ± 17.93 h，Tmax为 13.80 ± 13.20 h，Cmax为 2.33 ± 0.70 μg/mL，AUC0-∞为113.32 ± 34.94 μg·h/mL，AUC0-t 为 90.91 ± 17.80 μg·h/mL，Vd 为 1.69 ± 0.56 L/kg，Cl为 0.03 ± 0.01 L/kg/h。IVM和 IVM包合物的药动学参数结果表明：包合物组的 Cmax 和 AUC0-∞显著高于 IVM 原药组，表明包合物可明显增加 IVM的溶解度和溶出速率，从而增加药物吸收。t1/2比原药组的时间延长 1.29倍，说明包合物减缓了IVM在体内的消除速率，有利于增强药物的作用效果。 综上所述，本研究制备的 IVM-HP-γ-CD 包合物与 IVM 原药相比，有易溶于水、溶出速率快、稳定性提高、最大血药浓度增加，口服相对生物利用度高等特点，有利于提高药物在动物体内外的吸收，增强作用效果。
NETL