摘要
抗生素疗法所引发的不良后果已成为困扰奶牛乳腺炎防控难题，我国已明确减抗限抗目标，并制定了减抗限抗实施方案。中药提取物与抗生素联合应用能减少细菌耐药性产生，降低抗生素的使用量，已成为奶牛乳腺炎防控研究热点。本文从12种抗生素与13种中药提取物筛选药物，探究其对乳腺炎模型小鼠的治疗效果，为奶牛乳腺炎的绿色高效防控提供理论依据。主要研究结果如下： 1．对金黄色葡萄球菌具有协同增效作用药物组合筛选。利用K-B纸片法和牛津杯法分别筛选对奶牛源金黄色葡萄球菌敏感12种抗生素和13种中药提取物；通过微量棋盘法和FICI试验筛选出具有协同增效作用的中西联合用药组方，经正交试验确定药物比例。结果表明，黄连碱、黄芩苷、桂皮醛对金黄色葡萄球菌有良好抑菌效果，金黄色葡萄球菌对青霉素、阿莫西林、头孢噻呋、硫酸头孢喹肟敏感；硫酸头孢喹肟（2μg/mL）与桂皮醛（1.5 mg/mL）、阿莫西林（40μg/mL）与桂皮醛（0.5 mg/mL）、头孢噻呋（32μg/mL）与黄芩苷（0.5 mg/mL）均具有协同增效作用。 2．联合用药抑制金黄色葡萄球菌感染bMECs研究。借助金黄色葡萄球菌感染奶牛乳腺上皮细胞模型，通过测定金黄色葡萄球菌粘附率、bMECs病理变化研究联合用药效果。结果表明，硫酸头孢喹肟（40μmol/L）与桂皮醛（60μmol/L）联用可显著抑制金黄色葡萄球菌感染bMECs（Plt;0.05），效果优于其它联用用药组合。 3. 硫酸头孢喹肟与桂皮醛联用对金黄色葡萄球菌致小鼠乳腺炎的作用研究。利用奶牛源金黄色葡萄球菌致小鼠乳腺炎模型，通过测定小鼠乳腺细胞凋亡基因蛋白表达水平、乳腺组织载菌量以及观察形态学，评价中西药联用的临床治疗效果并筛选最佳治疗剂量。结果表明，硫酸头孢喹肟（2μg/mL）与桂皮醛（1.5 mg/mL）联合应用可显著抑制金黄色葡萄球菌感染小鼠乳腺，抑制了金黄色葡萄球菌感染导致的乳腺组织受损。 综上所述，硫酸头孢喹肟与桂皮醛联用具有协同作用，可抑制金黄色葡萄球菌感染bMECs和小鼠乳腺。本研究为防控奶牛乳腺炎实现减抗提供了思路，有利于推动国家减抗方案的实施，具有广阔应用价值。
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