摘要
副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis，HPS)引起的革拉瑟氏病(Glasser's disease)，是严重危害世界养猪业仔猪健康的最主要细菌性疾病之一。随着抗生素耐药性的增加和我国兽用抗生素使用减量化行动的开展，以及HPS的血清型多样性和地域差异性，多价灭活疫苗成为主要研究方向。副猪嗜血杆菌病单株多价灭活疫苗和弱毒疫苗可以克服多价灭活疫苗在菌体浓度、疫苗成本和免疫速度等方面的固有不足，但目前尚无对副猪嗜血杆菌单株多价灭活疫苗的报道，国内也无副猪嗜血杆菌病弱毒疫苗的报道。本研究开展的相关研究内容如下： 1.2023年初从送往安徽省农科院的33份病猪肺脏中，通过细菌分离培养、染色镜检、生化鉴定、NAD依赖性鉴测和PCR检测等方法，成功鉴定出6株HPS，其中血清4型和5型的比例均为33.3%(2/6)。制备了副猪嗜血杆菌兔高免标准血清，用琼扩实验鉴定了这6株HPS和菌种库中的24株HPS的血清型，其中有1株HPS(7174株)同时具备血清2、5、8、13型。 2.将30株HPS分别以1.2×109CFU/0.5mL腹腔注射Balb/c小鼠5只，7174株是强毒力菌株，能够使小鼠全部死亡；7321株(血清10型)、7276株(血清5型)是弱毒力菌株，感染的小鼠完全健活。将7174株试制成单株多价灭活疫苗，以2.0×109CFU/0.2mL皮下免疫的Balb/c小鼠，能够完全抵抗HPS血清5型和13型强毒力菌株，以及8型标准菌株的感染。 3.对弱毒力菌株7321株(血清10型)、7276株(血清5型)进行Balb/c小鼠的毒力检验和半数致死量测定，结果表明2株菌株的半数致死量都显著高于同血清型标准菌株；将7321株和7276株以1.2×109CFU/0.5ml分别在Balb/c小鼠体内连续传代10次，各代小鼠均健活，表明该试验菌株的毒力未发生返强，可以作为副猪嗜血杆菌病弱毒疫苗的候选菌株。
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