摘要
滁菊(Chrysanthemum morifolium cv.Chuju)作为药食两用的菊科菊属类植物，富含人体所需的多种营养物质。滁菊在我国的栽培历史悠久，但因为长期采用扦插和分株等传统无性繁殖手段进行繁殖，导致其品种退化，产量和质量大大下降，严重影响了滁菊产业的发展。本试验通过对滁菊离体再生体系的研究，确定了滁菊愈伤诱导、增殖、分化及生根培养的最佳培养基。同时，用秋水仙素处理再生体系中的愈伤组织及再生苗茎段，成功获得三倍体和四倍体滁菊，并对变异植株进行细胞层面及基因方向鉴定和表型性状观察。试验的主要结论如下： 1.滁菊的离体叶片再生体系的建立 以叶片为外植体，研究了不同植物生长调节剂对滁菊离体叶片再生体系的影响。结果表明：在外植体消毒阶段，75%酒精30s+1%次氯酸钠10min的消毒时间效果最佳，存活率达到73%。滁菊叶片在MS+6-BA0.5mg/L+2，4-D0.5mg/L的培养基中效果最好，其叶片诱导愈伤组织的诱导成功率都在85%以上；愈伤增殖的最佳培养基为MS+6-BA1mg/L+NAA0.3mg/L，其增值系数达到4.75；愈伤分化的最佳培养基为MS+2mg/L6-BA+1mg/LNAA，其分化效率为45.83%；生根的最佳培养基为1/2MS+0.1mg/LIBA，在此培养基上生根率为88%，平均根长达到7.76cm。 2.滁菊的多倍体诱导与鉴定 研究了不同浓度的秋水仙素对滁菊愈伤组织及再生苗茎段诱导的影响。结果表明：在对滁菊的愈伤组织进行诱导时并未成功，对再生苗茎段诱导时成功获得一个三倍体和多个四倍体以及部分嵌合体；其中0.025%秋水仙素处理滁菊再生苗茎段48h后诱导效果最好，变异率为3.89%，四倍体率为75.00%。 从形态学观察、细胞学鉴定、流式细胞仪鉴定对滁菊的多倍体和二倍体进行比较研究。试验结果表明，多倍体植株在表观性状、气孔大小、DNA含量、生理生化等方面与二倍体均有明显的差距。从表观性状观察，生长三个月后，多倍体植株矮小，茎段变粗，表现为生长迟缓。随着倍性的增加，植株的叶色加深，叶型指数变大。从细胞层面发现，随着倍性的增加，气孔逐渐变大，气孔密度逐渐变小。生理生化指标测定表明，随着倍性的增加，叶绿素含量增加，POD、CAT等酶活性增加。
NETL