摘要
背景：B族链球菌(Group B streptococcus，GBS)，属革兰氏阳性球菌，常定植女性的泌尿及生殖系统或胃肠道。全球约15%的孕妇(每年近2000万)存在GBS的阴道定植，其中超50万例出现胎膜早破、早产甚至死产等妊娠不良结局。CAMP(Christie-Atkinson-Munch-Peterson)实验是GBS鉴定的重要实验之一，是基于对一种扩散性细胞外蛋白(CAMP因子)的检测，具有较高特异性。该实验最早于1944年提出，目前多用于基层医院的GBS鉴定。CAMP因子是一种约24kDa的成孔蛋白毒素，由GBS的毒力基因cfb编码产生，使GBS在金黄色葡萄球菌附近培养时导致绵羊红细胞溶血，在血平板上出现箭头透明溶血区，即CAMP试验阳性。但随着检测技术不断发展，临床发现部分GBS菌株CAMP反应呈阴性，致使其极易漏检。故目前有研究认为CAMP实验对GBS阳性的鉴定缺乏敏感性，且cfb基因的靶向价值仍有待商榷，但既往CAMP阴性GBS菌株研究较少。 目的：分析妊娠晚期孕妇生殖道和直肠拭子分离的CAMP阴性GBS菌株耐药性、妊娠结局、MLST分型、血清分型及毒力基因分布特征。 方法：收集2017年1月-2021年12月期间在广州医科大学附属妇女儿童医疗中心就诊妇女生殖道和直肠拭子分离的55株CAMP阴性GBS，进行菌种鉴定及耐药性分析；以同期66株CAMP阳性GBS为对照，用多重聚合酶链反应(Multipolymerase chain reaction, MPCR)结合血清分型试剂鉴定菌株血清型，及多位点序列分型(Multilocus sequence typing，MLST)方法分析菌株ST型，PCR法检测11种毒力基因(fbsA, fbsB, lmb, bac, cylE, hylB, pavA, scpB, nevC, pbp1A,cfb)分布，分析CAMP阴性GBS株分子流行特征。 结果：(1)55株CAMP阴性GBS菌株对青霉素、氨苄西林、左氧氟沙星、头孢唑啉、万古霉素和利奈唑胺均100%敏感，对红霉素、克林霉素、四环素的耐药率分别为32.7%、56.4%、63.6%，对红霉素、克林霉素和四环素的多重耐药率为34.5%； (2)55株CAMP阴性GBS菌株中有45株来自妊娠35-37周孕妇，11例产妇有胎膜早破(占26.7%)，2例早产(占4.4%)，6例低出生体重儿(占13.3%)； (3)CAMP阴性GBS菌株以Ⅲ型(96.45%)为主，与CAMP阳性菌株血清型(Ⅲ37.88%，Ⅰa25.76%，Ⅰb15.15%)分布相比明显集中；CAMP阴性GBS菌株ST型集中于ST862(90.9%)，与CAMP阳性GBS菌株ST型分布较散，以ST19(19.70%)、ST23(15.15%)、ST17(13.64%)、ST10(9.09%)和ST862(7.58%)为主显著不同；CAMP阴性GBS血清型Ⅲ与ST862关联性最强，其次为ST651； (4)所有CAMP阴性GBS菌株均缺乏bac和cfb基因，并全部携带9种毒力基因(fbs B、fbs A、lmb、cyl E、hyl B、pav A、scp B、nev C、pbp 1A)。CAMP阳性菌株则全部携带7种毒力基因(fbs A、lmb、cyl E、hyl B、pav A、nev C、pbp 1A)，并呈现高比例的cfb(96.97%)和scpB(83.33%)，及更低的fbsB阳性率(53.03%)和更高的bac阳性率(13.64%)。 结论：孕妇生殖道定植的GBS菌CAMP阴性株与CAMP阳性株的荚膜血清型、MLST分型及毒力基因分布存在显著差异，CAMP阴性GBS对青霉素、氨苄西林、左氧氟沙星及红霉素敏感性较高，对克林霉素及四环素耐药性较高，亦可导致胎膜早破、早产、低出生体重儿等不良妊娠结局，临床应重视并持续监测CAMP阴性GBS菌株分子流行特征，在临床检测中联合其他鉴定方法提升CAMP阴性GBS菌株的检出率，并及时采取预防措施，减少不良妊娠结局发生。
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