摘要
选题依据：小建中汤出自《金匮要略》，主要由君药饴糖、臣药桂枝和白芍、佐药炙甘草、生姜、大枣组成，其中炙甘草既为佐药也为使药。饴糖有温补中焦、调养脾胃以及缓急止痛的功效。白芍具有补血敛阴、柔肝止痛的作用，桂枝可以温阳气，祛寒邪。生姜、大枣可以温胃散寒，补脾益气，炙甘草具有脾益调中，调和诸药的作用。六味药配伍，有温中补虚、和里缓急之效。临床上，小建中汤被广泛用于消化系统疾病。 慢性萎缩性胃炎（Chronic atrophic gastritis, CAG）是消化系统常见的慢性炎症性疾病，具有发病机制复杂、难治愈、易复发的特点。中药因其多成分、多靶点的特点可以多途径发挥药理作用。临床研究也表明小建中汤对于脾胃虚寒型慢性萎缩性胃炎具有良好的疗效。 对于中药复方来说，配伍是其核心，阐明药物的配伍规律对于揭示其药效机制至关重要。目前对小建中汤干预CAG的研究大多集中在药效方面，小建中汤的发挥药效的配伍机制并不明确。血清药物化学和代谢组学结合的方法可以将药效物质变化与内源性小分子的代谢变化联系起来，有利于揭示小建中汤干预CAG的配伍机制。 目的：在CAG大鼠模型上，从血清代谢产物的差异、内源性小分子的代谢轮廓的差异、代谢调控差异来初步研究小建中汤的配伍机制。 方法：（1）构建CAG大鼠模型，设置空白组、模型组、阳性药组、小建中汤全方组、减君药组、减臣药组、减佐药组。以大鼠的体重、胃液pH、胃蛋白酶活性、直立次数、穿越格子数及胃组织病理切片为传统药效学指标，比较各组之间的药效学差异。 （2）基于UPLC-Q-TOF MSE技术分析各给药组的血清原型成分及代谢产物，比较各组之间的吸收与代谢差异。 （3）基于代谢组学技术结合多元统计分析，系统比较各组血清代谢轮廓差异。筛选CAG的血清差异代谢物，比较各给药组对差异代谢物的调控差异。 （4）基于Spearman相关分析研究各组血清成分与差异代谢物之间的相关性，筛选强相关对并比较各组相关对的差异，对于具有强相关性的血清成分与差异代谢物，采用分子对接技术初步验证它们之间的相关性。 结果：（1）药效学结果显示，模型组大鼠的各项指标与空白组均有显著差异，给药后各项指标均呈现出不同程度的回调趋势，其中小建中汤全方组的效果显著优于减君药组、减臣药组和减佐药。比较各配伍组的药效结果，发现君药对改善CAG大鼠胃蛋白酶活性、胃液pH、胃黏膜的损伤及恢复模型大鼠的自发活动能力和探索行为贡献显著；臣药对改善CAG大鼠的体重、胃液pH和胃黏膜损伤有显著贡献；佐药对恢复模型大鼠损伤的胃黏膜、自发活动能力和探索行为贡献显著。 （2）血清药物化学分析结果显示，最终鉴定了小建中汤的12个原型成分、38个代谢产物；减君药组的10个原型成分、31个代谢产物；减臣药组的8个原型成分、32个代谢产物；减佐药组的4个原型成分和11个代谢产物。其中，君药影响了臣药中的3个成分的代谢、佐药中3个成分的吸收和14个成分的代谢；臣药影响了佐药中2个成分的吸收、12个成分的代谢；佐药影响了臣药中2个成分的吸收和4个成分的代谢。 （3）代谢组学结果显示，小建中汤全方组的代谢轮廓最接近空白组，其次是减君药组和减臣药组，减佐药组的代谢轮廓最接近模型组。对于22个差异代谢物，其中小建中汤全方组干预后有14个差异代谢物有显著回调的趋势，减君药组干预后有4个差异代谢物出现了显著回调的趋势，减臣药组和减佐药组干预后均只有牛磺胆酸出现了显著回调。对各给药组有显著性的差异代谢物进一步分析表明，君药对11个差异代谢物的回调贡献显著，臣药和佐药均对13个差异代谢物的回调贡献显著。 （4）Spearman相关分析共发现了小建中汤全方组的33个强相关对、减君药组的11个强相关对、减臣药组的29个强相关对、减佐药组的3个强相关对。各给药组强相关对的统计学分析表明，全方可能参与了CAG大鼠的7个差异代谢物的调节，君药可能参与了其中6个差异代谢物的调节，臣药可能参与其中1个差异代谢物的调节，佐药可能对7个差异代谢物均有调节。分子对接结果显示具有强相关性的血清成分与差异代谢物的一个和或多个靶点有较好的结合活性。 结论：本研究采用传统的药效学评价、血清药物化学和代谢组学技术，初步阐明小建中汤的君药、臣药和佐药在复方干预CAG的过程中发挥的作用，有助于深入理解中药复方的配伍机制。
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