摘要
巨噬细胞是骨髓中的单核细胞发育而来的具有多样性和可塑性的先天免疫细胞，能够吞噬和清除体内外来病原微生物或受损、凋亡和衰老的细胞，并分泌细胞因子调节细胞免疫应答。不同微环境诱导静息M0巨噬细胞的表型和功能极化。M0型巨噬细胞基本上可以分化为两种主要表型，即经典活化的 M1 型巨噬细胞，其分泌促炎细胞因子如TNF-α、IL-6和IL-1β，以及替代激活的M2型巨噬细胞，其分泌抗炎介质如IL-10、CCL18、CCL22和Fibronectin。布洛芬是一种具有抗炎活性的非甾体类药物，广泛用于治疗急性疼痛，如头痛、牙痛和类风湿性关节炎。此外，布洛芬在炎性疾病中的关键作用促使我们探索布洛芬对巨噬细胞极化的调控。因此，在本研究中我们利用 THP-1 细胞为体外研究炎症的细胞模型，通过 IFN-γ 和 LPS 或IL-4和IL-13的方案进行M1及M2巨噬细胞激活。布洛芬通过上调M1巨噬细胞中IκBα的表达，即一种抑制NF-κB活性的蛋白，以抑制NF-κB信号通路并且通过抑制IRF3和STAT1的磷酸化以抑制M1巨噬细胞的极化。布洛芬显著抑制THP-1来源的M2巨噬细胞的标志物的转录本，如IL-10、CCL18、CCL22和Fibronection。在布洛芬的处理下，M2巨噬细胞中IκBα的表达显著升高并且STAT1、STAT6和IRF3蛋白的磷酸化水平被显著下调。此外，我们发现布洛芬增强了M1和M2巨噬细胞的DNA损伤，抑制了磷酸化MRE11和RAD50介导的DNA损伤修复，尤其显著下调了M1和M2巨噬细胞中PARP1的表达。因此，我们推测布洛芬可能通过PARP1调控巨噬细胞的极化。在此，M0巨噬细胞转染PARP1特异性siRNA，然后极化为M1或M2巨噬细胞。我们发现，PARP1敲低显著抑制M1巨噬细胞CD80、IL-6、CXCL10和HLA-DR等标志物的转录，下调M1巨噬细胞NF-κB和JAK/STAT信号通路关键蛋白的磷酸化。同样，在M2巨噬细胞中，PARP1敲低可通过下调NF-κB和JAK/STAT信号通路关键蛋白的磷酸化，显著抑制M2巨噬细胞标志物的转录水平CCL22、IL-10和CCL18。因此，PARP1敲低抑制了M1和M2巨噬细胞的极化。通过使用PARP1抑制剂PJ34 进一步证实了 PARP1 在巨噬细胞极化中的作用。PJ34 抑制 M1 和 M2巨噬细胞极化过程中JAK/STAT信号通路的激活。最后，我们检测了PARP1敲低后感染结核分枝杆菌(Mtb) H37Ra 的 M1 和 M2 巨噬细胞中免疫调节基因的转录水平，发现下调PARP1对M1巨噬细胞抗Mtb功能的影响大于M2巨噬细胞。综上所述，结果表明PARP1在巨噬细胞极化中发挥调控作用，首次建立了DNA修复系统与巨噬细胞极化之间的交互通信关系。
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