摘要
目 的： 蒙药五味沙棘颗粒、六味安消颗粒，均是在蒙医药理论指导下，将蒙药经典方剂五味沙棘汤散剂和六味安消汤散剂改剂型为无糖配方颗粒而制成的，为传统蒙药汤散剂剂型基础上的工艺改良。目前关于蒙药五味沙棘与六味安消颗粒的质量控制、体内吸收作用机制研究较少，不能体现出中医理论的整体观念。基于此，本文从中药复方整体性出发，建立二者规范化质量控制方法，并进一步研究六味安消颗粒治疗功能性便秘体内吸收、药效作用，为质量控制和临床应用提供理论依据。 方 法： 1.应用网络药理学、分子对接对五味沙棘颗粒治疗慢性支气管炎的质量标志物进行筛选。 2.通过高效液相色谱方法，对10批五味沙棘颗粒的指纹图谱进行研究；并对10批五味沙棘颗粒中栀子苷、芦丁、甘草酸单铵盐、木香烃内酯、去氢木香烃内酯进行定量表征；采用薄层色谱法对五味沙棘颗粒的定性鉴别进行研究。 3.运用液质联用技术，对六味安消颗粒化学成分进行研究与解析。 4.应用网络药理学、分子对接对六味安消颗粒治疗功能性便秘的质量标志物进行筛选。 5.通过高效液相色谱方法，对10批六味安消颗粒的指纹图谱进行研究；并对10批六味安消颗粒中没食子酸、对甲氧基肉桂酸乙酯、芦荟大黄素、异土木香内酯、大黄酚、大黄素进行定量表征；采用薄层色谱法对六味安消颗粒进行定性鉴别。 6.利用液质联用技术，采集六味安消颗粒干预前后大鼠血浆数据，对六味安消颗粒原型入血成分进行分析。 7.通过盐酸洛哌丁胺诱导，建立功能性便秘大鼠模型，观察大鼠体征与小肠推进率的变化，采用酶联免疫吸附法检测各组大鼠血清中检测各组大鼠血清中大鼠P物质（SP）、胃动素（MTL）、胃泌素（GAS）、大鼠血管活性肠肽（VIP）的水平。 8.同时采用代谢组学方法，对盐酸洛哌丁胺诱导的功能性便秘大鼠模型进行体内成分分析；对比经六味安消颗粒干预后，功能性便秘大鼠血中的差异代谢物，探讨作用机制。 结 果： 1.网络药理学、分子对接获得五味沙棘颗粒基于慢性支气管炎药效作用的质量标志物分别为栀子苷、甘草酸单铵盐、芦丁、木香烃内酯、去氢木香烃内酯。 2.构建10批五味沙棘颗粒指纹图谱，标定共有峰20个；建立了栀子苷、芦丁、甘草酸单铵盐、木香烃内酯、去氢木香烃内酯的定量测定方法，10批样品含量具有差异。同时建立了五味沙棘颗粒中木香、栀子、甘草的薄层鉴别方法。 3.建立了六味安消颗粒化学成分的全息谱，在正负离子模式下，共解析出六味安消颗粒化学成分61种，其中蒽醌类19个、鞣质类17个、有机酸类5个、黄酮类4个、萜类5个、其他类成分11个。 4.通过网络药理学、分子对接明确了六味安消颗粒治疗功能性便秘的质量标志物，分别为没食子酸、对甲氧基肉桂酸乙酯、芦荟大黄素、异土木香内酯、大黄酚、大黄素。 5.构建10批六味安消颗粒特征指纹图谱，标定共有峰25个；建立了六味安消颗粒中没食子酸、对甲氧基肉桂酸乙酯、芦荟大黄素、异土木香内酯、大黄酚、大黄素的定量测定方法，样品含量具有一定差异；建立了六味安消颗粒中大黄、诃子的薄层鉴别方法。 6.共鉴定六味安消颗粒原型入血成分14种，分别为没食子酸、对甲氧基肉桂酸乙酯、原儿茶醛、原儿茶酸、芦荟大黄素、大黄酸-8-O-β-D-吡喃葡萄糖苷、大黄酸、山奈酚、白黎芦醇、异土木香内酯、大黄素、大黄酚、丝氨酸、大黄素甲醚。 7.与正常组比较，功能性便秘大鼠小肠推进率显著降低，血清中MTL、G AS、SP水平降低，VIP水平升高。与模型组比较，六味安消颗粒组小肠推进率明显升高，血清中MTL、GAS、SP水平升高，VIP水平降低，说明六味安消颗粒具有调节胃肠道功能的作用。 8.代谢组学研究发现，对于六味安消颗粒给药后功能性便秘大鼠血浆中差异代谢物共23个，其中有20个代谢物上调，3个化合物下调。 结 论： 1.建立了五味沙棘与六味安消颗粒的薄层鉴别方法、指纹图谱和含量测定方法，可控制制剂的质量。 2.确定了五味沙棘颗粒5个质量标志物，分别为栀子苷、甘草酸单铵盐、芦丁、木香烃内酯、去氢木香烃内酯。 3.明确了六味安消颗粒的化学成分共61种，其中蒽醌类19个、鞣质类17个、有机酸类5个、黄酮类4个、萜类5个、其他类成分11个。 4.确定了六味安消颗粒6个质量标志物，分别为没食子酸、对甲氧基肉桂酸乙酯、芦荟大黄素、异土木香内酯、大黄酚、大黄素。 5.鉴定了六味安消颗粒原型入血成分14种，主要为蒽醌类，并对其血药浓度变化进行研究。 6.六味安消颗粒组干预后，大鼠小肠推进率明显升高，血清MTL、GAS、SP水平升高，VIP水平降低，说明六味安消颗粒具有调节胃肠道功能的作用。 7.六味安消颗粒干预功能性便秘大鼠后，共有23个差异代谢物，主要通过甘氨酸、丝氨酸等代谢途径，发挥作用。
NETL