NETL
帕瑞昔布钠通过下调Wnt/β-catenin信号通路抑制乳腺癌增殖、迁移和侵袭
李宛军1
作者信息
摘要
目的：通过体外细胞实验，拟研究帕瑞昔布钠对 MCF-7细胞株增殖、迁移、侵袭行为的影响及相关分子机制，揭示帕瑞昔布钠作为镇痛药和辅助抗肿瘤药治疗乳腺癌的潜力，为临床乳腺癌防治提供新思路和新靶点。 方法：（1）采用CCK-8法检测帕瑞昔布钠作用于乳腺癌MCF-7细胞 24、48h时的半抑制率（IC50），为后续实验提供药物处理浓度参考；（2）CCK-8法进行细胞增殖实验，验证帕瑞昔布钠作用于乳腺癌MCF-7细胞24、48h对其的增殖抑制作用；（3）流式细胞术检测帕瑞昔布钠处理乳腺癌MCF-7细胞24、48h后对其细胞周期的影响；（4）细胞划痕实验、Transwell实验检测帕瑞昔布钠对乳腺癌细胞迁移、侵袭行为的影响；（5）Western blot 实验检测帕瑞昔布钠处理乳腺癌 MCF-7细胞，Wnt/β-catenin信号通路蛋白及其下游蛋白 Cyclin D1 的表达情况；（6）qRT-PCR 技术检测帕瑞昔布钠处理乳腺癌MCF-7细胞后miR-21的表达水平。 结果：（ 1 ）帕瑞昔布钠作用 MCF-7 细胞株 24h 的 IC50为343.7μM，48h的IC50为119.7μM；（2）增殖实验结果表明：帕瑞昔布钠对 MCF-7 细胞株增殖具有抑制效应，呈剂量-时间依赖性；（3）流式细胞术结果表明：帕瑞昔布钠可将实验组乳腺癌 MCF-7细胞周期阻滞于G0/G1期。实验组处理细胞24h后，阻滞在G0/G1期的乳腺癌细胞的比例随着帕瑞昔布钠浓度的增加逐渐增大，当药物浓度≥200μM时，与对照组差异具有统计学意义(P＜0.05)；当药物处理细胞 48h后，阻滞在 G0/G1期的乳腺癌细胞的占比逐渐增加，呈量效关系(P＜0.05)；（4）划痕愈合、Transwell迁移侵袭结果：帕瑞昔布钠能在体外抑制乳腺癌 MCF-7细胞株的迁移、侵袭能力。与对照组相比，实验组的细胞迁移率明显降低，迁移侵袭数量明显减少(P＜0.05)；（5）Western blot结果：Wnt/β-catenin信号通路蛋白、Cyclin D1 表达水平下降(P＜0.05)；（6）qRT-PCR 结果：经帕瑞昔布钠处理后miR-21表达水平随浓度升高而下降 (P＜0.05)。 结论：帕瑞昔布钠可能通过下调Wnt/β-catenin信号通路和miR-21的表达抑制乳腺癌MCF-7细胞增殖、迁移和侵袭能力。
关键词
帕瑞昔布钠/乳腺癌/Wnt信号通路/β-连环蛋白/非编码小分子RNA-21/细胞增殖/细胞迁移/细胞引用本文复制引用
授予学位
硕士学科专业
麻醉学导师
王白云/张志伟学位年度
2022学位授予单位
南华大学语种
中文中图分类号
R9