摘要
黄连素是一种从植物中提取的生物碱，分子式 C20H18NO4+，分子量 336.36。黄连素可用来治疗糖尿病，还能调节鸡兔等动物的糖脂代谢稳态，但迄今为止有关其调节鱼类葡萄糖稳态的研究较少。鱼类对糖的利用能力低下,不同食性鱼类对糖利用的能力也不相同。本实验以肉食性鱼类珍珠龙胆石斑鱼、杂食性鱼类尼罗罗非鱼以及草食性鱼类草鱼为研究对象，在高糖饲料中添加黄连素，通过经典的营养学方法、分子生物学技术和组学方法，探究黄连素对不同食性鱼的生长性能、糖代谢能力、胆汁酸合成和肠道菌群的影响。 1、高糖饲料中添加黄连素对珍珠龙胆石斑鱼生长、糖代谢能力、胆汁酸合成以及肠道菌群的影响 以珍珠龙胆石斑鱼为研究对象，对照组（C）碳水化合物水平为 20.2%，高糖组（H）碳水化合物水平为 30.2%，HB1-HB4组是在高糖组的基础上添加 25、50、75、100mg/kg 黄连素。养殖周期为八周，实验结果显示：高糖饲料增加了石斑鱼的饲料系数（FC），增加了糖异生酶丙酮酸脱羧酶（PC）等活力和肝肠胆汁酸的含量（P＜0.05）。在高糖饲料中添加黄连素后，与C组相比，HB2组的甘油三酯（TG）等血清生化指标降低（P＜0.05），丙酮酸激酶（PK）等糖酵解酶的活力和基因表达增加（P＜0.05），PC 等糖异生酶的活力和基因表达降低（P＜0.05），糖原的含量增加（P＜0.05）。HB2 组胆固醇 7α-羟化酶（CYP7A1）等的胆汁酸限速酶的活力和基因表达显著低于C组（P＜0.05），肝肠胆汁酸的含量增加（P＜0.05）。肠道菌群结果显示，HB2组的变形菌门和厚壁菌门丰度降低。综上所述，高糖饲料中添加少量黄连素能对产生胆汁酸的肠道菌群造成影响，进而抑制糖异生，最终调节石斑鱼葡萄糖稳态。因此在高糖饲料添加 49mg/kg的黄连素有利于石斑鱼的生长。 2、高糖饲料中添加黄连素对尼罗罗非鱼生长、糖代谢能力、胆汁酸合成以及肠道菌群的影响 以尼罗罗非鱼为研究对象，对照组（C）碳水化合物水平为 29.1%，高糖组（H）碳水化合物水平为 44.1%，HB1-HB4组是在高糖组的基础上添加 25、50、75、100mg/kg 黄连素。养殖周期为八周，实验结果显示：高糖饲料降低了罗非鱼的增重率（WGR），增加了血清中血糖（GLU）等含量，肝脏糖异生酶丙酮酸脱羧酶（PC）等活力，肠道胆汁酸含量也增加（P＜0.05），肠道内厚壁菌门的丰度降低。在高糖饲料中添加黄连素后，与 C 组相比，HB4 组丙酮酸激酶（PK）等糖酵解酶的活力增加，丙酮酸脱羧酶（PC）等糖异生酶的活力降低（P＜0.05），甾醇-27-羟化酶（CYP27A1）等胆汁酸限速酶的活力随着黄连素含量的增加而降低（P＜0.05）。肠道菌群结果显示，HB4组的梭杆菌门丰度增加，拟杆菌门丰度降低。综上所述，黄连素通过改变肠道菌群的结构，刺激胆汁酸生成，使其促进糖酵解抑制糖异生，来影响罗非鱼的糖代谢。因此在高糖饲料中添加100mg/kg黄连素有利于罗非鱼的生长。 3、高糖饲料中添加黄连素对草鱼生长、糖代谢能力、胆汁酸合成以及肠道菌群的影响 以草鱼为研究对象，对照组（C）碳水化合物水平为 30.8%，高糖组（H）碳水化合物水平为45.8%，HB1-HB4组是在高糖组的基础上添加25、50、75、100mg/kg 黄连素。养殖周期为八周，实验结果显示：高糖饲料增加了草鱼的饲料系数（FC），增加了血清中血糖等含量，肝脏糖异生酶丙酮酸脱羧酶（PC）和甾醇-12α-羟化酶（CYP8B1）等胆汁酸限速酶的活力增加（P＜0.05）。肠道菌群中厚壁菌门的丰度降低。在高糖饲料中添加黄连素后，与 C组相比，HB4组的血糖（GLU）等血清生化指标降低（P＜0.05），肝脏中磷酸果糖激酶（PFK）糖酵解酶的活力增加（P＜0.05），丙酮酸脱羧酶（PC）等糖异生酶的活力（P＜0.05）降低，肝糖原含量增加。FXR 表达上调，甾醇-12α-羟化酶（CYP8B1）等胆汁酸限速酶的活力随着黄连素含量的增加而降低（P＜0.05）。肠道菌群中梭杆菌门的丰度增加。综上所述，黄连素通过改变肠道菌群的结构，刺激 FXR，使其促进糖原合成来调节草鱼的血糖。因此在高糖饲料中添加100mg/kg黄连素有利于草鱼的生长。 综上所述，在高糖饲料中添加黄连素能调节不同食性鱼类的糖代谢，且黄连素的添加量与鱼类的食性有关，肉食性鱼类的石斑鱼饲料中黄连素最适添加量为 49mg/kg，杂食性鱼类的罗非鱼和草食性鱼类的草鱼添加 100mg/kg的黄连素有利于其生长。
NETL