摘要
目的： 阿霉素广泛用于癌症治疗，但其心脏毒性限制了临床应用,阿霉素诱导心脏毒性机制尚未清楚，铁死亡是阿霉素心脏毒性中受调节的细胞死亡的主要形式。甘草苷（Liquiritin，LIQ）是甘草根的主要成分，具有抗炎、抗氧化、抗凋亡、抗菌和抗癌作用，但其是否对阿霉素诱导心脏毒性有缓解作用尚未清楚，本研究通过建立阿霉素（Doxorubicin，DOX）心脏毒性小鼠和细胞模型，给予不同浓度甘草苷干预，探讨甘草苷是否调控SLC7A11/GPX4信号通路抑制心肌细胞铁死亡途径改善阿霉素心脏毒性和心肌细胞损伤作用。为预防阿霉素心脏毒性提供实验和理论依据。 方法： 1、动物实验：采用一次性腹腔注射剂量达15 mg/kg 盐酸多柔比星溶液，建立c57小鼠阿霉素急性心脏毒性损伤模型。观察动物体重、心脏重量、心脏组织病理变化；生化试剂盒测定小鼠血清CK、CTnT、和LDH含量。c57小鼠随机分为5组：正常组（ Control组）、阿霉素组（DOX组）、阿霉素组+甘草苷低剂量组（DOX+LIQ L组）、阿霉素组+甘草苷中剂量组（DOX+LIQ M组）、阿霉素组+甘草苷高剂量组（DOX+LIQ H组）。HE染色检测心肌形态学变化；生化试剂盒检测CK和LDH水平；微孔板酶标法检测心脏组织中GSH、GSH-px、MDA、SOD和LPO含量；免疫组化和Western blot法测定小鼠心肌SLC7A11和GPX4蛋白表达。 2、细胞实验：采用阿霉素浓度梯度干预H9c2大鼠心肌细胞，建立阿霉素心肌细胞损伤模型；并使用甘草苷干预心肌细胞。实验分为4组：正常组（Control组）、阿霉素组（DOX组）、阿霉素组+甘草苷低剂量组（DOX+LIQ L组）、阿霉素组+甘草苷高剂量组（DOX+LIQ H组）。24 h，CCK8检测细胞活力； LDH检测细胞坏死水平，微孔板酶标法测MDA含量，流式细胞术检测ROS水平，Western Blot检测心肌细胞SLC7A11和GPX4蛋白水平。 结果： 1、动物实验：1）与Control组相比，DOX组小鼠体重明显减轻、心脏重量系数下降、心肌细胞形态结构发生紊乱;血清CK活力、CTnT、和LDH含量明显升高；而给予甘草苷干预后，可以减缓阿霉素诱导的心脏毒性。2）与DOX组相比较，给予甘草苷处理后可以很大程度增加GSH、GSH-px和SOD活力降低MDA和LPO含量；并且很大程度恢复SLC7A11和GPX4蛋白水平。 2、细胞实验：1）与Control组相比，阿霉素处理导致H9c2细胞损伤，如细胞活力降低和坏死显著增加；SLC7A11和GPX4蛋白水平显著下降。2 ）与DOX组相比较，给予甘草苷处理后能够增加细胞活力和降低细胞坏死；减少脂质过氧化MDA含量和ROS水平；并且增加SLC7A11和GPX4蛋白表达。 结论： 1、甘草苷对阿霉素诱导的心脏毒性具有保护作用。 2、甘草苷可能是抑制心肌细胞铁死亡发挥对阿霉素诱导心脏毒性的保护作用。 3、甘草苷调控SLC7A11/GPX4信号通路预防阿霉素诱导心脏毒性。
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