摘要
番茄病毒病是番茄生产中的主要病害之一，传播速度快且严重制约着番茄的品质和产量，造 成极大经济损失。为进一步确认宁夏银川地区侵染番茄的病毒病种类，本研究采集本地区疑似病 样，利用分子检测手段鉴定病毒种类;对5个番茄品种进行药剂防治试验，通过测定生长、品质、 产量指标以及检验侵染病毒种类，防病效果等，筛选出了表现较佳的药剂与番茄品种;选取南方 番茄病毒(STV)、番茄黄化曲叶病毒(TY)和番茄褪绿病毒(ToCV)三种病毒复合侵染的番 茄叶片样本，进行了单一 RT-PCR/PCR检测与多重PCR检测，通过田间发病植株验证，建立3 种病毒复合侵染多重PCR检测体系。为宁夏地区番茄病毒针对性预防和防治提供技术支撑。试 验主要结果如下: (1)在宁夏银川地区采集121份疑似感染病毒病叶片进行RT-PCR/PCR检测，结果表明宁 夏银川地区番茄植株存在多种病毒复合侵染情况，复合侵染样品占总样品数量的94.21％,3种病 毒复合侵染的样本数量最多，ToCV+ToMV+TSWV复合侵染病毒为当地优势毒源;在宁夏地区首 次检出单一样品复合侵染ToMV、STV、TSWV、ToMMV与ToCV五种病毒，并构建了以上五 种病毒的进化树。 (2)对3种药剂+1个对照、5个番茄品种，开展了药剂防治番茄病毒病试验，通过记录、测 定共20个处理的番茄生育期、生长指标、农艺性状、营养品质指标、产量，并进行了病毒检测与 抗性病评价等，结果采用隶属函数综合分析，综合排序前三的依次为A3B3、A4B3与A3B5处理， 产量最高的为A3B3处理，A3药剂(进口三氯异氰尿酸)与B3品种(粉映3号)，适宜作为宁夏地 区秋茬设施栽培较佳施用药剂与番茄品种。 (3)以田间同时检测出STV、TY与ToCV的番茄叶片为研究材料，设计STV的特异性引 物，挑选 TY 与 ToCV 引物，建立了能同时检测 TY(648bp)、STV(148bp)、ToCV(450bp) 的三重PCR检测体系，20μL反应体系为:cDNA模板1 μL,DNA模板1 μL，10μL2×Taq Master Mix,三种病毒的上下游引物各0.5 μL(10μmol·L-1)，ddH2O 5μL。退火温度56.3℃,循环次数 为34时扩增效率最高且条带清晰。运用该体系对田间番茄样本进行检测，检验结果与单重 PCR/RT-PCR结果一致，说明该体系能有效应用于实践。
NETL