摘要
近年来，中国肉鸡养殖行业正在经历着由传统向规模化、集中化发展的转型，在全球肉鸡产量排名中，中国仅次于美国，是全球第二大肉鸡生产国，且产量占比逐年提升。肠道健康被认为是家禽养殖中最重要的方面之一，它直接关系到家禽的生产性能、免疫及营养物质的消化吸收。壳寡糖(Chitosanoligosaccharides，COS)为天然的氨基葡萄糖碱性聚合物是一种功能性益生元，具有抗菌、抗炎、抗氧化、调节肠道菌群等多种生物学功能。本试验通过在白羽肉鸡日粮中添加COS，通过其对肉鸡生产性能，肠道消化吸收功能、抗氧化、炎症反应、肠道屏障功能及盲肠微生物的影响，探究其影响肉鸡肠道健康的作用机理，以期为COS在肉鸡饲料中的应用提供科学参考。 1.壳寡糖对肉鸡生产性能和肠道消化吸收功能的影响 本试验选取288只体重相近（40.47±0.29g）健康的1日龄的白羽肉鸡，随机分为4组，每组6个重复，每个重复12只鸡。对照组（CON）饲喂基础日粮，壳寡糖组在基础日粮中分别添加200（COS200）、400（COS400）和800mg/kgCOS（COS800），试验期为35天。日粮添加COS对肉鸡各个阶段及整个试验周期无显著影响。日粮添加COS提高（P＜0.05）肉鸡14日龄十二指肠相对重量，十二指肠和回肠绒毛总表面积，空肠脂肪酶活性，十二指肠GLUT1、SGLT1、PepT1，空肠SGLT1、PepT1及回肠SGLT1、PepT1和FABP1mRNA相对表达量。日粮添加COS提高（P＜0.05）肉鸡35日龄空肠相对长度，胰腺和十二指肠及回肠相对重量，十二指肠和回肠绒毛高度、十二指肠和回肠绒毛高度隐窝深度比、十二指肠绒毛总表面积，十二指肠和空肠淀粉酶、空肠蔗糖酶、碱性磷酸酶及空肠和回肠麦芽糖酶活性，十二指肠PepT1、FABP1及空肠和回肠GLUT1mRNA相对表达量。日粮添加COS降低（P＜0.05）14日龄肉鸡回肠淀粉酶和碱性磷酸酶活性，降低（P＜0.05）空肠和回肠GLUT1mRNA相对表达量。日粮添加COS降低（P＜0.05）35日龄肉鸡回肠PepT1和FABP1mRNA相对表达量。结论，日粮添加COS通过改善肠道形态学特征，提高小肠消化酶活性和营养物质转运载体相关基因mRNA的表达来提高肠道的消化吸收能力。 2.壳寡糖对肉鸡肠道屏障功能、炎症反应及抗氧化能力的影响 在试验一的基础上，进一步研究COS对肉鸡肠道屏障功能、炎症反应及抗氧化能力的影响，日粮添加COS提高（P＜0.05）14日龄肉鸡十二指肠Occludin、ZO-1、Nrf2、CAT、GPX1、Cu/ZnSOD，空肠Occludin、CAT及回肠TLR4、MyD88、Nrf2、CAT、GPX1mRNA的相对表达量，提高十二指肠CAT、GSH-Px、T-SOD和空肠CAT、T-SOD活性。日粮添加COS提高（P＜0.05）35日龄肉鸡十二指肠Occludin、Claudin-1、ZO-1、IL-1β，回肠NF-κBp65、IL-1βmRNA相对表达量，十二指肠CAT、GSH-Px、T-SOD及空肠和回肠CAT、GSH-Px活性。日粮添加COS降低（P＜0.05）14日龄肉鸡血清DAO含量和十二指肠IL-1β和空肠ZO-1、TLR4、MyD88、NF-κB、IL-1β及回肠TNF-αmRNA相对表达量，十二指肠、空肠和回肠MDA含量及回肠T-SOD活性。日粮添加COS降低（P＜0.05）35日龄肉鸡血清DAO含量，十二指肠MyD88、TNF-α及空肠和回肠TNF-αmRNA相对表达量及回肠MDA含量。结论，日粮添加COS通过促进紧密连接蛋白相关基因mRNA的表达来增加肠道紧密连接，提高肉鸡小肠抗氧化酶活性并促进Nrf2-ARE信号通路抗氧化相关基因mRNA的表达来增加肠道的抗氧化功能，抑制TLR4/NF-κB信号通路并下调下游促炎因子的表达降低肠道炎症，提高肠道屏障功能。 3.壳寡糖对盲肠菌群的影响 在试验一和试验二的基础上，进一步探究COS对肉鸡盲肠菌群和短链脂肪酸的影响。日粮添加COS对肉鸡盲肠菌群Alpha和Beta多样性无显著影响，提高（P＜0.05）盲肠Butyricicoccus、Subdoligranulum、Sellimonas相对丰度，降低（P＜0.05）盲肠Romboutsia相对丰度。日粮添加COS提高（P＜0.05）盲肠乙酸、丙酸和总酸含量，14日龄十二指肠FFAR2和FFAR3，35日龄十二指肠FFAR2和空肠FFAR2、FFAR3mRNA表达水平。日粮添加COS降低（P＜0.05）14日龄肉鸡回肠FFAR2和FFAR3mRNA表达水平。相关性分析表明，SCFAs与Proteobacteria相对丰度与戊酸、己酸和总戊酸呈正相关，Verrucomicrobiota相对丰度与戊酸、己酸和总戊酸含量呈负相关。SCFAs含量与Bacteroides、Lactobacillus、Faecalibacterium、Streptococcus、Butyricicoccus、Escherichia-Shigella、Monoglobus、Christensenellaceae_R-7_group、Lachnospiraceae_UCG-010、Subdoligranulum和Sellimonas相对丰度呈正相关，与Akkermansia、Shuttleworthia、UCG-005、Erysipelatoclostridium、Phascolarctobacterium和Romboutsia相对丰度呈负相关。乙酸含量与空肠隐窝深度、回肠绒毛高度隐窝深度比和丙酸与十二指肠总表面积呈正相关，与空肠绒毛高度隐窝深度比与乙酸含量和回肠绒毛高度与戊酸和总戊酸含量呈负相关。十二指肠Claudin-1mRNA表达量与丁酸、戊酸、己酸、总丁酸、总戊酸含量呈正相关，DAO含量与乙酸、丙酸和总SCFAs含量呈负相关，空肠ZO-1mRNA表达量与丁酸、己酸和总丁酸含量呈负相关。SCFAs关联性主要存在于回肠促炎因子于乙酸、异丁酸、异戊酸和总酸之间，与回肠NF-κBp65和IL-1β相对表达量呈正相关，与回肠TNF-α相对表达量呈负相关。SCFAs与肠道抗氧化因子主要与关联性与乙酸、丁酸、总丁酸和总酸有关，与乙酸、丙酸和总酸含量呈正相关，与丁酸和总丁酸含量呈负相关。结论，日粮添加COS通过改善肠道菌群结构和SCFAs含量改善肠道形态学特征、屏障功能、抗氧化能力及降低肠道炎症反应改善肠道健康。 综上所述，日粮添加COS能够改善肠道功能和健康，这与COS提高肉鸡消化吸收能力、改善肠道紧密连接功能、提高肠道抗氧化性能和抑制炎症因子的产生及改善肠道微生态平衡有关。
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