摘要
长林小蠹(Hylurgusligniperda)是松属的破坏性害虫,近年来,该害虫在我国山东省沿海地区防护林大面积发生,严重危害黑松(Pinusthunbergii)。球孢白僵菌(Beauveriabassiana)作为重要的生物防治手段,被广泛应用。本研究通过长林小蠹僵虫分离鉴定出球孢白僵菌,利用球孢白僵菌对长林小蠹幼虫与成虫进行毒(杀虫)力测定。同时测定长林小蠹幼虫和成虫被球孢白僵菌侵染后,其酶活性变化,并且对长林小蠹幼虫与成虫体表进行扫描电镜观察。同时测算出在野外自然条件下,受长林小蠹危害但未防治区域,每克土中球孢白僵菌的数量,解答了为什么长林小蠹受灾区存在致病真菌,但长林小蠹种群依然爆发这一问题,为长林小蠹生物防治奠定理论依据。主要研究结果如下: (1)经鉴定,从长林小蠹僵虫虫体上分离纯化得到的是4株不同的球孢白僵菌,编号Bbz1、Bbz2、Bbz3、Bbz4。 (2)对Bb01、87305、Bb02、Bbz1、Bbz2、Bbz3和Bbz4这7株球孢白僵菌进行毒力测定,发现接种Bbz4菌株7d后,1×108孢子/mL浓度的孢子悬浮液对长林小蠹幼虫致死率达到100%,LC50为3.68×105孢子/mL;接种Bbz1菌株7d后,1×108孢子/mL浓度的孢子悬浮液对长林小蠹成虫致死率达到100%,LC50为3.27×106孢子/mL。并且测算出,在野外自然条件下每克土中球孢白僵菌的数量为5.6×103个。 (3)使用菌株Bbz4和菌株Bbz1对长林小蠹幼虫和成虫的侵染进行超微结构观察发现,在接种0-12h时,菌株分生孢子接触并附着在长林小蠹体表;接种18h时,发现孢子萌发并产生芽管;接种36h时,发现有菌丝向内穿透体壁的现象出现;接种72h时,菌丝伸出体外;接种96-120h时,整个虫体被菌丝覆盖。 (4)球孢白僵菌Bbz1侵染长林小蠹后,抑制长林小蠹体内SOD酶活性。 综上所述,分离鉴定出的球孢白僵菌中,菌株Bbz1对成虫毒杀效果最好,菌株Bbz4对幼虫的毒杀效果最好,并且野外自然条件下每克土中球孢白僵菌分生孢子的数量不足以使长林小蠹死亡。同时,球孢白僵菌侵染长林小蠹需要经过接触附着、孢子萌发、侵入表皮、定殖生长和侵染致死等过程。菌株Bbz1可有效抑制长林小蠹SOD酶活性。