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两种茄子近缘野生种原生质体融合技术研究

郭欢欢

两种茄子近缘野生种原生质体融合技术研究

郭欢欢1
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作者信息

  • 1. 中国农业科学院
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摘要

茄子(SolanummelongenaL.)在我国蔬菜的生产和消费中占重要地位。近年来嫁接技术已广泛应用于茄子保护地生产中,以提高茄子对土传病害的抗性。然而我国茄子砧木品种单一,加上现有砧木在农艺性状上不利于嫁接栽培的推广。因此,选育适合的砧木,尤其是加强抗两种以上土传病害砧木选育是砧木育种的重要目标。体细胞杂交能够克服有性杂交中远缘杂交不亲和性障碍,获得具备双亲部分遗传特性。本研究以茄子近缘野生种水茄(S.torvum)和蒜芥茄(S.sisymbrifoliu)为试验材料,通过优化茄子近缘野生种原生质体分离、融合及培养体系,获得体细胞杂种株系。主要研究结果如下: 1.水茄和蒜芥茄叶肉原生质体游离试验表明,水茄和蒜芥茄在0.3%纤维素酶+0.1%离析酶+2%PVP+3mmol/LMES中分别酶解14-16h和11-13h获得较高产量的原生质体。 2.对供试原生质体电融合参数进行比较,试验结果表明交变电场(AC)90V/cm、AC作用时间9s、直流脉冲电压为(DC)1250V/cm、DC脉冲时间为45us融合效率最佳。 3.对供试材料原生质体培养采用MS(1mg/L2,4-D,0.5mg/LKT)、KM8p(1mg/LNAA,0.2mg/L2,4-D,0.5mg/LZT)和KM(1mg/LNAA,0.2mg/L2,4-D,0.5mg/LZT)培养基进行培养,试验结果表明蒜芥茄原生质体在MS和KM8p培养基中培养出现褐化的愈伤颗粒,KM培养基中出现绿色愈伤颗粒。水茄在三种培养基中未出现愈伤颗粒。采用KM培养基对融合后原生质体进行培养获得700块愈伤组织,580株再生植株,愈伤组织再生率为83%。 4.试验随机挑选366株再生植株进行流式细胞仪倍性分析,试验结果发现亲本水茄波峰在30左右,亲本蒜芥茄波峰在50左右,两亲本波峰差异较大,由此推断,水茄0株,蒜芥茄25株,占6.83%;4倍体杂种植株170株,占46.45%;4倍体蒜芥茄133株,占36.34%;多倍体植株38株,占10.38%。 对倍性分析后的再生植株进行SSR标记分析,试验结果表明波峰在50、100、150和200的植株只含有蒜芥茄的特异条带,波峰在80、130和180的植株含有两亲本特异条带,未出现只有水茄特异性条带,结果与流式细胞仪分析结果一致。

关键词

茄子/体细胞杂交/原生质体/电融合

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授予学位

硕士

学科专业

园艺

导师

连勇

学位年度

2019

学位授予单位

中国农业科学院

语种

中文

中图分类号

S6
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