摘要
烟草黑胫病的防治是一项复杂的系统工程，需要结合各种手段进行综合防治，其中选育抗病新品种是最为有效的方法。目前国内大部分抗病品种遗传背景相似、抗性来源单一，对环境变化的适应能力和抗病性逐年下降。本试验通过对库存种质资源进行分析，选取合适的抗性材料作为远缘杂交的亲本，以人工接种黑胫病菌谷的方式筛选抗病杂交后代，通过SSR分子标记和过氧化物同工酶电泳对杂交后代进行外源遗传物质检测，完成抗黑胫病代换系/附加系创制的初筛。研究结果如下: （1）利用筛选的34对烟草多态性SSR引物，对取自国家烟草种质资源库的73份抗黑胫病烟草种质进行遗传多样性分析。结果表明，在国家烟草种质库中，抗黑胫病种质之间存在着较高的遗传变异，种质遗传多样性较丰富，但遗传背景相似度较为一致的所占比例较大，遗传背景差异极大和极小的材料所占比例非常小，合理选择抗病亲木材料是提高烟草抗黑胫病育种效率的前提。 （2）四个杂交组合的蒴果膨大程度、种子有胚率、种子大小及饱满程度和发芽能力检测及盆栽实验结果等表明，中烟100与两个野生烟的亲和性高于K326,在利用远缘杂交转移野生烟遗传物质的过程中，中烟100更适合作为受体亲木材料。 （3）利用SSR分子标记和过氧化物同工酶电泳对所获F1植株进行杂种真实性鉴定。结果表明，仅Z-N组合获得了真正的远缘杂种，同时筛选出20对特异性SSR引物，可用于该组合后世代杂种的鉴定和相应位点片段的追踪。 （4）利用筛选的20对特异性SSR标记对抗黑胫病F2、BC1群体进行外源染色体检测，在位点YS-08、YS-17、YS-20和YS-33处，F2世代和BC1世代均能检测到外源染色体/片段;此外，F2世代还在YS-07位点检测到野生烟条带。其中，在YS-08、YS-17和YS-20这3个位点处野生烟染色体/片段通过交换、附加或代换的形式进入到受体中，构成了新的遗传体系并能够稳定遗传;在YS-07和YS-33位点处，外源染色体游离在受体细胞稳定遗传体系外，未能得到稳定遗传。在本试验中普通烟草的1号、7号、11号和17号染色体（引物位点YS-07、YS-33）均有部分同源野生烟片段进入受体亲本中，其中野生烟5号染色体/片段（引物位点YS-08）整合到新的遗传体系中得以稳定遗传下来。 （5）通过过氧化物同工酶电泳对抗黑胫病F2、BC1群体进行外源染色体检测，在F2及BC1世代中均能检测出野生烟特异性条带，且其2条主要条带分别来自双亲，说明在进行外源染色体导入的过程中，有参与调控相关基因表达的基因进入到受体细胞中，并在蛋白水平上表现差异 （6）根据抗性筛选以及外源染色体鉴定的结果，共初筛出129株含有外源遗传物质的抗黑胫病烟草植株。
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