摘要
随着生物技术的迅速发展,基因工程在作物新品种培育中已广泛应用,并取得了很多突破性的成果。利用基因工程手段获得有新性状的转基因植株,通过各种分子检测手段对外源基因的遗传稳定性进行检测,结合常规育种手段对现有作物品种进行改良,从而实现转基因植株走向产业化。 本课题对利用花粉管通道法获得的转cry1Ah基因抗虫玉米高代自交系(PXH1和PXH2)以及利用基因枪法获得的转Btcry1Ah基因抗虫玉米(HF)进行分析,通过分子检测和田间玉米螟抗性试验,分析外源基因cry1Ah在转基因玉米中的遗传稳定性,利用回交转育对获得的高抗转基因玉米株系与有优良农艺性状的自交系郑58进行回交,并且对回交后代进行分子跟踪检测和田间玉米螟抗抗性鉴定,得到的结果如下: (1)Btcry1Ah基因可以在PXH1和PXH2转基因玉米中逐代稳定遗传,在T11代达到纯合,通过Southernblot证明cry1Ah基因分别以单拷贝(PXH1)和双拷贝(PXH2)的形式整合。 (2)Btcry1Ah基因可以在HF转基因玉米中逐代稳定遗传,在T5代阳性率达到90.75%,接近纯合。 (3)利用回交转育手段,分别获得回交F1*代(PXH1和PXH2)和BC2F1代(HF)种子,通过对各世代的Cry1Ah蛋白表达量和田间玉米螟抗性进行分析,发现两种指标均比供体亲本高。 (4)通过荒地竞争实验,结果表明转基因玉米的生存竞争能力要远远小于杂草,不会影响环境中的物种多样性。