摘要
目的 探讨双阴性T(Double-NegativeT，DNT)细胞及T淋巴细胞亚群在乳腺癌中的免疫应答情况以及与乳腺癌临床病理特征的关系，并联合血清肿瘤标志物通过构建列线图模型分析对乳腺癌筛查诊断的预测价值。 方法 采用病例对照研究方法，回顾性选取中国人民解放军联勤保障部队第九六〇医院2021年9月30日至2023年4月18日乳腺癌患者82例（乳腺癌组）、乳腺良性肿瘤患者88例（乳腺良性肿瘤组）及健康体检者81名（健康组）。通过电化学发光法检测分析肿瘤标志物癌胚抗原（Carcinoembryonicantigen，CEA）、糖类抗原125（Carbohydrateantigen125，CA125）、糖类抗原15-3（Carbohydrateantigen15-3,CA15-3），利用流式细胞术检测3组外周血DNT细胞及T淋巴细胞亚群的免疫应答情况。分析DNT细胞及T淋巴细胞亚群与乳腺癌患者的临床病理关系。以健康组和乳腺癌良性肿瘤组为对照，采用二元logistic回归分析乳腺癌发生的影响因素，基于多因素logistic回归分析结果构建乳腺癌发生风险的列线图预测模型，采用受试者工作特征(ROC)曲线、校准曲线及决策曲线分析（DCA）评估预测模型的效果。 结果 健康组、乳腺良性肿瘤组和乳腺癌组在中位年龄、月经情况、高血压及糖尿病上差异均无统计学意义(P＞0.05)。健康组、乳腺良性肿瘤组和乳腺癌组CEA（μg/L）含量的中位数分别为1.24、1.28、1.70；CA125amp;nbsp;（U/mL）含量的中位数分别为10.92、10.95、14.36；CA15-3（U/mL）含量的中位数分别为8.13、8.21、11.19。3组肿瘤标志物CEA、CA125及CA15-3差异均有统计学意义（P＜0.001）。 乳腺癌组CD4+T细胞百分比、CD4+/CD8+比值及DNT细胞百分比分别为33.74%、1.35和7.84%均高于健康组的26.75%、1.02和3.82%，并且乳腺癌组的DNT细胞百分比7.84%高于良性肿瘤组的4.34%。良性肿瘤组CD4+T细胞百分比和CD4+/CD8+比值分别为34.28%和1.32，均高于健康组的26.75%和1.02。差异均有统计学意义(P＜0.001)。 CD3+T细胞百分比和CD4+T细胞百分比在乳腺癌病理分型中差异均有统计学意义(P=0.019和P=0.002)；与乳腺癌淋巴无转移组相比，转移组CD3+T细胞百分比、CD4+T细胞百分比及DNT细胞百分比均降低，差异有统计学意义(P=0.009、P=0.047和P=0.005)；与乳腺癌早期(Ⅰ+Ⅱ期)相比，晚期组(Ⅲ+Ⅳ期)CD3+T细胞百分比、CD4+T细胞百分比及DNT细胞百分比均降低，差异有统计学意义(P＜0.001、P=0.003和P=0.027)；增殖细胞核抗原Ki-67高表达组CD4+T细胞百分比低于低表达组，差异有统计学意义(P=0.041)；乳腺癌分子分型中CD3+T细胞百分比、DNT细胞百分比均存在差异且有统计学意义(P=0.003和P=0.007)。 二元logistic回归分析提示，相比较于健康体检者，DNT细胞百分比、CEA、CA125、CA15-3是乳腺癌发生的独立影响因素，差异均有统计学意义(P＜0.001、P=0.034、P=0.007和P=0.014)；相比较乳腺良性肿瘤患者，DNT细胞百分比、CEA、CA125、CA15-3是乳腺癌发生的独立影响因素，差异均有统计学意义(P＜0.001、P=0.013、P=0.017和P=0.011)。ROC曲线显示，DNT细胞百分比、CEA、CA125、CA15-3、CEA+CA125+CA15-3、DNT+CEA+CA125+CA15-3评估健康组和乳腺癌组时曲线下面积分别为0.810、0.702、0.714、0.727、0.812和0.897；评估乳腺肿瘤良恶性时曲线下面积分别为0.739、0.684、0.665、0.700、0.774和0.838。相较于健康体检者及乳腺良性肿瘤患者，预测乳腺癌发生的2组模型的校准曲线均接近理想曲线，表明预测模型与实际情况相吻合。并且2组模型的决策曲线均在高风险阈值0.01~0.99范围内，表明预测模型有较高的临床价值。 结论 1、DNT细胞及T淋巴细胞亚群与乳腺癌临床病理特征存在显著关联，与乳腺癌疾病进展密切相关。 2、DNT细胞百分比及肿瘤标志物（CEA、CA125和CA15-3）与乳腺癌发生发展密切相关，基于以上因素建立预测乳腺癌的列线图模型，提高了乳腺癌的预测效能，为乳腺癌临床诊断提供指导依据。
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