摘要
都梁软胶囊是由白芷和川芎两味川产道地药材组成的上市中成药，用于风寒瘀血阻滞脉络所致的头痛。其现行质量控制方法以高效液相色谱法测定主要成分含量为主，有待发展全面可靠的质量控制和评价体系，以保证药物的安全性和有效性。本研究探索性地将Microtox(微毒)技术应用于白芷、川芎及其复方制剂都梁软胶囊的质量评价。建立了以青海弧菌Q67为模式生物，测定其加入样品后的发光强度，计算抑制率，绘制浓度-效应曲线，以IC50值为评价指标的评价方法，分别对10个批次的三种样品进行评价。所建立的方法专属性强，精密度高，重复性好，样品对青海弧菌Q67的浓度-效应关系显著，不同批次样品的IC50值差异部分显著。表明Microtox技术可以作为一种关联生物效应的新的质量评价方法用于白芷、川芎和都梁软胶囊的质量控制及评价。 有效性是药品的基本属性之一，都梁软胶囊在长期的临床实践中显示出良好的偏头痛防治作用，其复发率低，不良反应轻，远期疗效佳，但相关的基础研究尚且薄弱。本研究通过网络药理学方法及皮质扩布性抑制(CSD)偏头痛大鼠模型研究都梁软胶囊对先兆偏头痛的药理作用及机制，为其临床有效性增加科学依据。研究采用网络药理学方法收集都梁软胶囊活性成分和偏头痛的共有靶点，构建蛋白互作网络，使用拓扑分析和生信富集分析预测都梁软胶囊影响偏头痛的关键物质基础及作用通路。预测发现都梁软胶囊中欧前胡素、藁本内酯等27个潜在活性成分可能通过作用于中枢神经及血管系统，参与调控钙信号通路、神经元信号传导和递质表达等过程多靶点多层级实现对偏头痛的防治作用。 采用氯化钾刺激造成的CSD先兆偏头痛大鼠模型，研究都梁软胶囊预防性给药：0.32、0.65、1.30g(内容物)/kg对CSD大鼠刺激侧皮质脑电信号、C-FOS表达以及炎症因子IL-1β、TNF-α、iNOS以及COX-2mRNA表达，血浆降钙素基因相关肽(CGRP)、P物质(SP)和5-羟色胺(5-HT)以及脑干CGRP、SP和β-内啡肽(β-EP)表达的影响，并基于转录组测序技术筛选都梁软胶囊作用于CSD大鼠的候选基因及代谢通路。结果显示都梁软胶囊各给药组可以不同程度地升高CSD大鼠氯化钾刺激1h内的皮质脑电信号波幅标准化值，降低刺激侧皮质C-FOS的表达，下调CSD大鼠血浆CGRP和脑干组织CGRP、SP水平，上调ND3等128个、下调Socs2等37个关联氧化磷酸化、IL-17、Toll样受体信号通路等多条代谢通路的基因，而对5-HT、β-EP以及炎症因子mRNA的表达影响不大。表明都梁软胶囊预防给药对CSD大鼠具有一定的对抗作用，它可以通过改善CSD大鼠皮质脑电的抑制状态，减轻皮质受到的伤害刺激，下调中枢及外周血管活性神经肽表达，调控氧化磷酸化等多条信号通路相关的基因多靶点多层级实现对先兆偏头痛的防治作用。 本研究基于青海弧菌Q67的发光生物效应建立了可行的白芷、川芎及其成方制剂都梁软胶囊的质量生物评价方法，同时通过网络药理学方法、皮质扩布性抑制偏头痛模型以及转录组测序技术初步揭示都梁软胶囊可作用于中枢和外周多靶点多层级改善皮质扩布性抑制，对抗先兆偏头痛，为白芷、川芎和都梁软胶囊质量生物评价以及都梁软胶囊的临床有效性增加了科学依据。
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